肠道腺病毒41型染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 肠道腺病毒41型染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Enteric Adenovirus Type 41 Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3623 |
产品组成
预混反应液(含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等)
荧光染料(结合DNA后激发波长500 nm,发射波长530 nm)
阳性对照(定量/定性检测参考品)
阴性对照(无模板对照)
说明书及数据分析指南
保存条件
-20℃避光保存,避免反复冻融,有效期12个月。
检测原理
基于SYBR Green等染料的荧光定量PCR技术,通过监测扩增过程中荧光信号的变化,实现对肠道腺病毒41型DNA的定性与定量分析。
操作步骤
样本处理:提取待测样本DNA。
反应体系配制:按20 μL/反应加入预混液、引物、模板及染料。
PCR程序设置:
预变性:95℃ 2分钟
循环阶段(40 cycles):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(信号采集步骤)
数据采集:在延伸阶段实时采集荧光信号(530 nm)。
结果分析
定量检测:以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线,计算待测样本浓度。
定性检测:
阴性对照Ct≥40,阳性对照Ct≤30且呈典型扩增曲线。
样本判定:Ct≤35为阳性,Ct≥40为阴性;35<Ct<40需复测,复测Ct<40判为阳性。
注意事项
避免试剂污染,分区操作(样本处理、PCR配制、扩增区分离)。
反应体系需避光操作,防止荧光淬灭。
复测样本若仍处于灰区(35-40),建议结合临床其他指标综合判断。
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