鼠肺炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 鼠肺炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Murine Pneumonitis Virus Dye-based Quantitative Real-time RT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR2653 |
产品特点
即开即用：预混优化引物、探针及反应体系，用户仅需提供样品RNA模板。
高灵敏度：引物与探针针对鼠肺炎病毒保守区域设计，检测限低至10^2拷贝/μL。
高特异性：不与常见呼吸道病毒（如埃可病毒等）发生交叉反应。
质控完善：含阳性对照（定量分析需标准曲线，定性分析需1个阳性对照），可有效排除假阴性。
实验流程
RNA提取：
使用兼容的核酸提取试剂盒纯化样品RNA，建议提取N+2个样本（含阴性/阳性对照）。
反应体系配制（20μL/管）：
定量分析：需标记N+9管（N+2样本管、1阴性对照管、6标准曲线管）。
定性分析：需标记N+4管（N+2样本管、1阴性对照管、1阳性对照管）。
按比例加入预混液、引物探针、模板RNA（阴性对照以水替代）。
qPCR程序设置：
逆转录：50℃ 15分钟；预变性：95℃ 2分钟；扩增：95℃ 15秒→60℃ 1分钟（40循环）。
自备耗材与设备
灭菌离心管（1.5mL/2.0mL）及PCR管（0.2mL/八联管）
移液器（10μL-1000μL）及灭菌吸头
辅助设备：离心机、涡旋混匀器、金属浴、均质机、电子天平等
性能参数
特异性：引物经生物信息学验证，确保100%种属特异性。
灵敏度：最低检出限0.1%，无需增菌即可检测103cfu/mL浓度样本。
重现性：经多批次验证，重复性达100%。
注意事项
操作规范：阳性对照需最后加样，避免污染。
数据判读：Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性；阴性对照无扩增。
运输与存储：避免反复冻融，开封后分装保存。
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