检验原理
本试剂盒基于SYBR Green染料法荧光定量PCR技术，针对黑曲霉基因高度保守区域设计特异性引物。通过实时监测PCR扩增过程中荧光信号的变化，实现对黑曲霉核酸的定性及定量检测。分析灵敏度可达100拷贝/反应，线性范围覆盖至少5个数量级。
产品名称
黑曲霉染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称
Aspergillus niger Dye-Based qPCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR2727
试剂组成
黑曲霉扩增液：25μL×1管
黑曲霉反应液：975μL×1管
阳性质控品（1×10⁸拷贝/μL）：50μL×1管
阴性质控品：50μL×1管
说明书：1份
注意事项：
不同批号组分不可混用。
试剂需低温运输，-20℃保存，避免反复冻融。
操作步骤
DNA提取（样本制备区）
使用兼容的核酸提取试剂盒或自选方法纯化样本DNA。
标准曲线制备（独立区域操作）
标记6支离心管（7至2号），每管加入45μL DEPC-H₂O。
取5μL阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）加入7号管，震荡混匀，得到1×10⁷拷贝/μL标准品。
依次梯度稀释至2号管，最终浓度范围为1×10⁷~1×10²拷贝/μL。
PCR反应体系配置（反应区）
按20μL体系配制：
模板DNA：2μL
扩增液：1μL
反应液：17μL
上机程序设置：
预变性：95℃ 5分钟
扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光）
性能参数
特异性：引物经优化，不与相近物种DNA发生交叉反应。
灵敏性：检测下限100拷贝/反应。
用途：科研用途，适用于环境、食品或临床样本中黑曲霉的检测。
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