产品用途
适用于黄曲霉(Aspergillus flavus)核酸的定性及定量检测,线性范围覆盖5个数量级,仅限科研使用。
产品名称
黄曲霉染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称
Aspergillus flavus Dye-based qPCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR4203
产品组成
2×荧光定量PCR预混液:含SYBR Green I染料、热启动DNA聚合酶及优化缓冲体系。
阳性对照:1×10^8拷贝/μL黄曲霉特异性DNA片段(非活体样本)。
DEPC-H₂O:无核酸酶水,用于稀释标准品。
说明书(当前文件)。
规格:50次反应(20μL体系/次)。
操作流程
样本制备(样本制备区)
DNA提取:使用兼容的核酸提取试剂盒提取待测样本DNA。
标准曲线制备(独立操作区):
标记6管(7-2号),每管加45μL DEPC-H₂O。
7号管加5μL阳性对照(1×10^8拷贝/μL),震荡混匀得1×10^7拷贝/μL标准品。
依次10倍稀释至2号管(1×10^2拷贝/μL),冰上暂存。
qPCR反应(扩增区)
反应体系(20μL):
2×预混液:10μL
引物混合液(需自备):2μL
模板DNA:2μL
DEPC-H₂O:补至20μL
程序设置:
95℃ 3min(预变性)→ 40循环(95℃ 10s,60℃ 30s)→ 熔解曲线分析。
性能参数
灵敏度:可检测低至1×10^2拷贝/μL的靶标DNA。
特异性:熔解曲线单峰,无非特异性扩增。
稳定性:预混液4℃保存24小时性能无变化。
注意事项
标准品稀释需严格分区操作,避免污染。
建议使用带滤芯枪头,减少气溶胶干扰。
熔解曲线分析需验证扩增特异性。
保存条件:-20℃避光保存,有效期12个月。
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