产品特点
即开即用:预混优化试剂,用户仅需提供DNA模板。
高特异性:引物针对巨大芽孢杆菌专一序列设计,无交叉反应。
灵敏度高:染料法荧光定量检测,较常规PCR更精准。
闭管操作:减少气溶胶污染风险。
内置对照:含阳性对照,便于区分假阴性结果。
产品名称
巨大芽孢杆菌染料法qPCR试剂盒
英文名称
Bacillus megaterium Dye-based Quantitative Real-time PCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR2728
试剂盒组成
PCR MagicMix(预混酶、dNTPs、缓冲液等)
荧光染料(SYBR Green等)
巨大芽孢杆菌特异性引物混合液
阳性对照DNA
超纯水(无核酸酶)
操作步骤
1. 样本处理(样本处理区)
按标准方法提取样本DNA,建议使用柱式提取试剂盒。
2. 试剂配制(试剂准备区)
融化试剂组分,短暂离心混匀,避光保存。
按比例配制反应液(模板DNA+预混液+引物+染料)。
3. PCR扩增(核酸扩增区)
程序设置:预变性(95℃, 5min)→ 循环阶段(95℃ 10s, 60℃ 30s, 40循环)→ 熔解曲线分析。
4. 数据分析
定量检测:以阳性对照Ct值绘制标准曲线,计算样本浓度。
熔解曲线:验证扩增产物特异性。
注意事项
分区操作:样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行,避免污染。
防污染措施:使用一次性耗材,实验后以10%次氯酸或75%酒精清洁台面。
储存条件:-20℃避光保存,有效期1年。
技术参数
检测限:≤10拷贝/反应
线性范围:10^1~10^7拷贝/μL
重复性:CV <5%
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