产品特点
即开即用：预混优化试剂，仅需提供样品RNA模板。
高灵敏度与特异性：
引物及染料针对TPMT基因高度保守区设计，避免交叉反应。
检测限低至单拷贝级别，适用于低丰度样本。
质量控制：
含阳性对照，有效区分假阴性结果。
推荐设置技术重复（3孔）及阴性对照（NTC），符合MIQE准则。
高效稳定：
适配主流qPCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX等）。
预混液含稳定荧光染料，支持低/高Rox校正。
产品名称 | 硫嘌呤甲基转移酶染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Thiopurine S-Methyltransferase (TPMT) Dye-Based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR2733 |
实验流程
试剂准备
解冻与混匀：
试剂置于冰上缓慢解冻（5-10分钟），避免反复冻融。
轻柔颠倒混匀后短暂离心（1000 rpm，10秒）。
模板处理：
建议使用1×Dilution Buffer稀释cDNA至Ct值20-30范围。
反应体系配置（20μL/孔）
| 组分 | 体积（μL） |
| 预混液（含染料） | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| cDNA模板 | 2 |
| RNase-free H₂O | 6 |
注：
每样本设3次技术重复，需同步设置阴性对照（NTC）及内参基因（如GAPDH）。
qPCR程序设置
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 | 信号采集 |
| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 | 关闭 |
| 扩增 | 95℃ | 10 sec | 40 | 开启 |
| | 60℃ | 30 sec | | |
注意事项
样本要求：
RNA样本需无降解（RIN≥7），保存于液氮、干冰或Trizol中。
污染控制：
实验分区操作（试剂配制区、样本处理区、扩增区）。
使用RNase-free耗材，避免气溶胶污染。
数据分析：
采用ΔΔCt法计算基因相对表达量，需内参基因校正。
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