产品基本信息

规格:50次/盒(20 μL反应体系)
适用场景:科研用途(非临床诊断)
保存条件:-20℃避光保存,有效期12个月。
运输方式:低温泡沫箱加冰密封运输,阳性对照需单独存放。
产品名称 | 硫嘌呤甲基转移酶探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Thiopurine Methyltransferase (TPMT) Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4885 |

产品特点

即开即用:用户仅需提供样品核酸模板,预混优化试剂减少操作步骤。
高灵敏度与特异性:引物及探针针对TPMT高度保守区设计,避免与其他RNA交叉反应。
双重检测模式:支持定性与定量分析,定量线性范围达5个数量级(10<sup>1</sup>–10<sup>6</sup>拷贝/μL)。
内置对照:提供无传染性DNA片段作为阳性对照,便于区分假阴性结果。
操作流程

标准曲线制备(10倍梯度稀释)
标记6支离心管(6–1号),每管加入45 μL荧光RT-PCR专用稀释液。
依次将阳性对照(10<sup>7</sup>拷贝/μL)按梯度稀释至10<sup>6</sup>–10<sup>1</sup>拷贝/μL,每步更换枪头,震荡混匀后冰上暂存。
样品RNA提取
建议设置N+2个样本(含阳性/阴性对照),使用兼容的RNA提取试剂盒或本公司柱式病毒RNAout纯化。
qRT-PCR反应(20 μL体系)
定量分析:需N+9个反应管(样本、阴性对照、6个标准曲线点)。
加样要求:避免气泡,反应液避光操作,阳性对照最后加入以防污染。
数据分析
定量检测:以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴计算样本浓度。
定性检测:
阳性判定:Ct≤36且扩增曲线典型;阴性判定:Ct≥40。
临界值(36<Ct<40)需复测确认。
注意事项

分区操作:样本处理、试剂配制、加样需在不同区域进行,防止交叉污染。
实验防护:使用一次性耗材、手套及专用工作服,实验后以10%次氯酸或75%酒精消毒台面。
质量控制:每次实验需包含阴/阳性对照,反应液完全融化混匀后离心使用。
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关键字: 硫嘌呤甲基转移酶;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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