黑麦草腥黑粉菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 黑麦草腥黑粉菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Tilletia secalis Dye-based Quantitative Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR2687 |
产品概述
本试剂盒专用于检测黑麦草腥黑粉菌（Tilleiia walkeri Castl.）的DNA，采用染料法荧光定量PCR技术，适用于科研领域的定性及定量分析。试剂盒包含优化的引物、荧光染料、反应缓冲液及阳性对照，确保高灵敏度和特异性。
产品特点
即开即用：用户仅需提供纯化的DNA模板。
高灵敏度：引物及染料针对目标基因保守区域设计，检测限低至单拷贝级别。
特异性强：引物通过生物信息学验证，避免与其他微生物DNA交叉反应。
双重功能：支持绝对定量（标准曲线法）和相对定量，线性范围覆盖5个数量级。
质控完善：含阳性对照，有效排除假阴性干扰。
兼容性广：适配多数商业核酸提取试剂盒。
规格与储存
规格：50次反应（20μL体系/次）。
储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月；避免反复冻融。
实验流程
1. DNA提取（样本制备区）
使用自选方法或兼容试剂盒提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。
2. 标准曲线制备（独立操作区）
标记6管为梯度稀释点（如7-2），每管加45 μL DEPC水。
取5 μL阳性对照依次稀释，混匀后作为标准品（避免污染）。
3. PCR反应体系配制（试剂配制区）
按以下比例配制（示例）：
| 组分 | 体积（μL） |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上机检测
程序设置：预变性95℃ 3 min；40循环（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）；熔解曲线分析。
数据分析：根据Ct值及标准曲线计算样本浓度。
注意事项
分区操作：严格区分样本制备、试剂配制及扩增区，避免气溶胶污染。
阴性对照：每批次需包含无模板对照（NTC）。
结果判读：熔解曲线应为单一峰，否则需排查非特异扩增。
应用范围
仅限科研用途，不适用于临床诊断。
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