塞内卡病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 塞内卡病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Senecavirus A Dye-based Quantitative Real-time RT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR2697 |
预期用途
本试剂盒基于染料法荧光定量RT-PCR技术，用于特异性检测塞内卡病毒（SVA/SVV）的RNA。该病毒为单股正链RNA病毒，主要感染猪群，临床表现为蹄部及口鼻水疱、新生仔猪腹泻及神经症状，死亡率可达15%~30%。本产品适用于兽医诊断、疫情监测及科研实验。
检验原理
RNA提取：通过离心柱硅基质膜法从样本中提取病毒RNA。
反转录（RT）：以RNA为模板，利用反转录酶合成互补cDNA。
荧光定量PCR扩增：
采用优化引物及探针（染料法），通过高温变性、退火、延伸循环（35次），特异性扩增目标片段。
荧光信号与扩增产物量成正比，通过标准曲线定量病毒RNA载量。
产品特点
高灵敏度：引物经优化设计，可检测低拷贝数病毒RNA。
便捷性：即开即用，用户仅需提供RNA模板。
质控保障：含阳性对照，避免假阴性结果。
特异性强：针对SVA/SVV基因组保守区域设计，避免交叉反应。
操作流程（简要）
样本处理：采集组织或血清样本，按规范提取RNA。
反应体系配制：将试剂盒组分（酶、引物、缓冲液等）与模板RNA混合。
上机检测：按以下程序运行荧光定量PCR仪：
反转录：50℃ 15分钟
预变性：95℃ 2分钟
扩增循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（重复35次）
结果分析：根据阈值循环数（Ct值）及标准曲线判定样本病毒载量。
注意事项
实验需在无菌环境下操作，避免RNA降解。
试剂解冻后需充分混匀，避免反复冻融。
阳性对照需与待测样本分区域操作，防止污染。
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