产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术开发,专用于检测绵羊附红细胞体(Eperythrozoon ovis,又称绵羊嗜血支原体)的核酸。适用于科研用途,具有高灵敏度和特异性,支持定性与定量分析。
产品名称 | 绵羊附红细胞体(绵羊嗜血支原体)染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Ovine Hemoplasma Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3098 |

产品特点

即开即用:仅需提供样品DNA模板,操作便捷。
高灵敏度:检测限可达100拷贝/反应,引物针对保守序列设计,避免交叉反应。
质量控制:提供阳性对照,有效区分假阴性结果。
适用范围广:兼容主流荧光定量PCR仪(如ABI、Bio-Rad、LightCycler等)。
稳定性:-20℃保存,有效期12个月;50次反应体系(20μL/次)。
操作流程

1. DNA提取
使用兼容的核酸提取试剂盒制备样本DNA,建议在样本制备区完成。
2. 标准曲线制备(定量检测需选)
按梯度稀释阳性对照(10^8拷贝/μL起始),获得6个浓度梯度的标准品(10^7~10^2拷贝/μL)。
稀释需在独立区域进行,避免污染。
3. 试剂配制(试剂准备区)
按待检样本数(N)准备N+2个反应管(含阴性对照和阳性对照)。
按说明书比例加入预混液、引物、探针等组分。
4. 加样与扩增
每管加入2 μL模板(阴性对照为DEPC水,待测样本及阳性对照按序添加)。
离心后立即上机,运行预设PCR程序(扩增条件需参考仪器说明书)。
结果判读
定性分析:有效Ct值(阈值循环数)且Tm值与阳性对照一致判定为阳性。
定量分析:通过标准曲线(Ct值-log浓度)计算样本DNA浓度。
无效数据排除:
Tm值异常或阴性对照出现假阳性时,需排查污染并重复实验。
注意事项

实验分区操作(样本制备、试剂配制、扩增区),避免交叉污染。
低温运输保存,避免反复冻融。
仅限科研使用,不可用于临床诊断。
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