技术原理

本试剂盒基于SYBR Green I染料法荧光定量PCR技术,通过特异性引物扩增幽门弯曲杆菌保守基因序列(如23S rRNA或gyrB基因)。PCR扩增过程中,染料与双链DNA结合释放荧光信号,仪器实时监测荧光强度,通过Ct值(循环阈值)实现目标基因的定量检测。
产品名称 | 幽门弯曲杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Campylobacter pylori Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3106 |

核心性能参数

灵敏度:最低检测限达100拷贝/反应。
特异性:引物针对幽门弯曲杆菌高度保守区设计,与空肠弯曲杆菌等近缘菌无交叉反应。
线性范围:定量检测时覆盖5个数量级(10²–10⁷拷贝/μL)。
防污染设计:含dUTP/UNG酶系统(部分型号),可降解既往扩增产物,减少假阳性风险。
试剂盒组成

| 成分 | 规格(50次) | 功能描述 |
| 2×qPCR预混液 | 1 mL | 含DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺ |
| 幽门弯曲杆菌引物混合液 | 100 μL | 特异性引物对 |
| 阳性对照(1×10⁸拷贝/μL) | 50 μL | 定量标准品 |
| 阴性对照(超纯水) | 1 mL | 污染监控 |
| 荧光染料(SYBR Green I) | 50 μL | 信号检测 |
操作流程

样本DNA提取
推荐使用商品化DNA提取试剂盒(如磁珠法),确保纯度(A260/A280≈1.8–2.0)。
粗提方法:沸水浴裂解10分钟,离心取上清。
反应体系配制(20μL)
2×qPCR预混液 10 μL
引物混合液 2 μL
模板DNA 2–5 μL(≤200 ng)
超纯水 补足至20 μL
PCR扩增程序(以ABI 7500为例)
95℃预变性 10分钟 → 40循环:95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光) → 熔解曲线分析(60–95℃)。
质量控制
阳性对照:Ct值≤30表明试剂有效。
阴性对照:无扩增曲线(Ct值≥40或无信号)。
熔解曲线:单一峰确保扩增特异性。
运输与储存
运输条件:低温(-20℃)避光运输,干冰或冰袋保温。
保存条件:-20℃避光保存,有效期12个月,避免反复冻融(≤3次)。
注意事项

实验需在无菌环境下操作,防止气溶胶污染。
定量分析需绘制标准曲线(建议使用10倍梯度稀释阳性对照)。
本产品仅限科研用途,临床诊断需经当地法规认证。
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关键字: 幽门弯曲杆菌;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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