检验原理

本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术,针对鹅星状病毒(GAstV)基因组高度保守区域设计特异性引物。通过荧光信号实时监测核酸扩增过程,结合标准曲线实现病毒核酸的定性和定量分析。
产品名称 | 鹅星状病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Goose Astrovirus Universal Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3122 |

试剂盒组成

2×qPCR Magic Mix:预混含DNA聚合酶、dNTPs及优化缓冲液(500 μL,棕色管)。
荧光PCR专用模板稀释液:用于样本核酸稀释(1 mL,黄盖)。
GAstV特异性引物混合液:靶向1型/2型鹅星状病毒(100 μL,白盖)。
阳性对照:1×10^8 拷贝/μL的GAstV核酸(50 μL,黄盖)。
性能参数

特异性:引物经生物信息学验证,仅对GAstV 1型/2型有效扩增。
灵敏度:最低检测限为10拷贝/μL(优于常规PCR)。
重复性:批内/批间变异系数(CV)≤5%。
标准曲线:
1型GAstV:Ct = -3.052×log(拷贝数) + 40.939
2型GAstV:Ct = -3.185×log(拷贝数) + 40.614
操作步骤

样本处理:按标准方法提取样本RNA/DNA,用稀释液调整浓度。
反应体系配制:每20μL反应含10μL 2×Mix、2μL引物、2μL模板、6μL无核酸酶水。
PCR程序:
预变性:95℃ 3分钟
40循环:95℃ 10秒 → 60℃ 30秒(荧光采集)
数据分析:根据扩增曲线和Ct值判定结果,通过标准曲线计算病毒载量。
注意事项

储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
质量控制:每批次实验需包含阴性对照(无模板)和阳性对照。
交叉污染防控:建议在超净台或PCR工作站中操作。
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关键字: 鹅星状病毒;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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