猫源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 猫源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Cat-derived Component Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3195 |
检验原理
本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对猫源性成分基因高度保守区域设计特异性引物。通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现对猫源性成分的定性和定量检测。
试剂组成
猫源性成分扩增液：50μL×1管
猫源性成分反应液：含优化引物、SYBR Green染料、dNTPs及缓冲体系
阳性对照：1管（含猫源性标准品，用于实验质控）
阴性对照：1管（无核酸酶水）
性能特点
高灵敏度：检测限可达10拷贝/μL（需配合标准曲线验证）。
特异性强：引物经严格筛选，避免与其他物种DNA交叉反应。
操作简便：预混反应液，用户仅需提供模板DNA。
双重应用：支持定性和定量分析，定量线性范围覆盖5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。
操作步骤
样本处理：按标准方法提取待测样本DNA。
反应体系配制：
每20μL反应体系含：10μL反应液、2μL模板DNA、8μL无核酸酶水。
阳性/阴性对照需同步设置。
PCR程序：
预变性：95℃ 5分钟；
扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环，荧光采集）；
熔解曲线分析：60℃~95℃（可选，验证扩增特异性）。
结果判读：
定性：Ct值≤35且熔解曲线为单一峰判为阳性；
定量：通过标准曲线计算模板浓度。
注意事项
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。
避免反复冻融试剂，开封后建议分装保存。
操作需在无菌环境下进行，防止交叉污染。
不同仪器需优化反应条件，建议优先使用ABI 7500、Bio-Rad CFX等主流荧光定量PCR仪。
质量控制
阳性对照Ct值应在预期范围内，阴性对照无扩增曲线。
若样本重复检测差异＞1个Ct值，建议重新提取核酸。
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