牛羚关联恶性卡他热病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

牛羚关联恶性卡他热病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，专用于检测牛羚关联恶性卡他热病毒（Wildebeest-associated Malignant Catarrhal Fever Virus, WA-MCFV）的核酸。适用于科研用途，具有高特异性、灵敏性和即开即用的特点。

产品特点

即开即用：用户仅需提供DNA模板，预混试剂包含PCR所需全部成分（含上样染料）。

高特异性：引物经优化设计，仅扩增WA-MCFV靶序列，无交叉反应。

内控设计：提供阳性对照（1×10^8拷贝/μL），用于区分假阴性结果。

兼容性：PCR产物可直接上样电泳，无需额外添加染料。

检测范围：50次40μL体系的荧光定量PCR反应。

规格及成分

| 成分 | 规格/包装 | 说明 |

| PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） | 含缓冲液、dNTPs、热启动酶 |

| 超纯水 | 1 mL（亮黄色） | 稀释模板或对照 |

| PCR引物混合液 | 100 μL（白盖） | WA-MCFV特异性引物 |

| PCR阳性对照 | 50 μL（黄盖） | 1×10^8拷贝/μL |

操作流程

样本准备：提取待测样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

反应体系配制（40μL体系）：

PCR MagicMix 3.0：20 μL

引物混合液：2 μL

DNA模板：5 μL

超纯水：补足至40 μL

PCR程序：

预变性：95℃ 5分钟

循环（40次）：95℃ 30秒 → 60℃ 30秒（荧光采集） → 72℃ 30秒

终延伸：72℃ 5分钟

结果分析：通过荧光阈值（Ct值）定量，标准曲线范围为10^1–10^7拷贝/μL。

注意事项

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

适用范围：仅限科研，不可用于临床诊断。

交叉污染防控：阳性对照稀释需在独立区域操作，使用带滤芯枪头。

质量控制

阳性对照应显示典型扩增曲线，阴性对照无信号。

若出现异常结果，需检查试剂保存条件及操作步骤。

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