鸡传染性喉气管炎病毒染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Infectious Laryngotracheitis Virus (ILTV) Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR3226
检测原理
本试剂盒基于实时荧光定量PCR技术，针对鸡传染性喉气管炎病毒的特异性基因序列设计引物和探针。在PCR反应体系中加入荧光基团，通过实时监测荧光信号积累，实现对病毒核酸的定量或定性分析。
技术特点
高灵敏度：最低可检测至100拷贝/反应的病毒核酸。
强特异性：与其他禽类常见病毒无交叉反应。
快速高效：全程检测时间约1-2小时。
试剂组成
禽传染性喉气管炎荧光qRT-PCR反应液（AILT-qRT-PCR MIX）
酶混合物（Enzymes MIX）
阳性对照（AILT-PTC）
阴性对照（NTC）
无核酸酶水（Nuclease-Free Water）
操作流程
样本采集
采集气管渗出物、支气管、肺组织、肾脏或输卵管等标本。
RNA提取
使用商业化RNA提取试剂盒（如过柱法）提取核酸。
反应体系配制
按样本数+1管阴性对照+1管阳性对照计算反应管数，每管加入15μL预混液和5μL样本/对照。
qRT-PCR扩增
反应体系20μL，循环条件如下：
45℃ 10分钟（反转录）
95℃ 10分钟（预变性）
40个循环（95℃ 15秒 → 60℃ 45秒）
PCR扩增参数（适用于不同仪器）
反应体积：20μL或25μL（视具体试剂盒版本而定）。
通道选择：FAM通道采集荧光信号。
循环条件（部分版本可能略有调整）：
37℃ 2分钟（UNG处理，可选）
95℃ 3分钟（预变性）
40个循环（95℃ 5秒 → 55℃ 40秒，采集荧光信号）
结果判读
试剂盒有效性判定
阳性对照：典型S型扩增曲线或Ct值≤35。
阴性对照：Ct值＞38或无Ct值，扩增曲线为直线或轻微斜线。
样本结果判定
阳性：Ct值≤35或有明显指数增长期。
可疑：Ct值在35~38之间，需重复检测确认。
注意事项
实验操作需在符合生物安全要求的实验室进行。
避免反复冻融试剂，以免影响检测灵敏度。
不同批次的试剂盒成分可能存在优化调整，建议以实际说明书为准。
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