牛传染性鼻气管炎病毒染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus (IBRV) Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR3241
预期用途
本试剂盒基于SYBR Green荧光染料法，通过实时荧光定量PCR技术定性检测牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）核酸，适用于临床样本（如鼻拭子、组织液等）的快速检测，为疾病诊断和流行病学监测提供依据。
检验原理
针对IBRV保守基因序列设计特异性引物，PCR扩增过程中SYBR Green染料与双链DNA结合释放荧光信号，通过实时监测荧光强度定量分析病毒核酸载量。
主要组成成分
PCR预混液（含SYBR Green染料、dNTPs、Taq酶等）
IBRV特异性引物混合液
阳性对照（含IBRV靶基因片段，1×10^8 copies/μL）
阴性对照（灭菌纯水）
核酸释放剂（可选，用于样本前处理）
包装规格：25T/盒、50T/盒
储存条件及有效期
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期12个月。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪，包括：
ABI 7500/QuantStudio系列
Bio-Rad CFX系列
Roche LightCycler 480
杭州博日LineGene系列等
样本要求
样本类型：鼻拭子、组织匀浆液、支气管肺泡灌洗液等。
保存条件：
短期（≤72小时）：2~8℃冷藏；
长期：-20℃以下冻存，避免反复冻融。
检验步骤
样本处理：
液体样本离心取上清，组织样本需匀浆后提取DNA。
反应体系配制（以25μL体系为例）：
PCR预混液：12.5μL
引物混合液：2μL
模板DNA：5μL
超纯水补至25μL。
PCR程序：
预变性：95℃ 5分钟；
扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环，荧光采集）。
结果判读
阳性：扩增曲线呈S型，Ct值≤35；
阴性：无扩增曲线或Ct值＞38。
注意事项
实验分区操作，避免污染；
试剂解冻后需涡旋混匀并瞬时离心；
阳性对照需与待测样本分开存放。
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