肠道致细胞病变人孤儿病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 肠道致细胞病变人孤儿病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Enteric Cytopathic Human Orphan Virus (ECHO Virus) Dye-based qRT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3227 |
产品概述
本试剂盒基于染料法荧光定量RT-PCR技术开发，专用于检测肠道致细胞病变人孤儿病毒（ECHO病毒）的RNA。通过实时监测荧光信号，实现对样本的定性和定量分析，适用于科研用途。
技术原理
采用实时荧光定量PCR技术，通过荧光染料（如SYBR Green I）与双链DNA结合释放荧光信号，实时监测扩增过程。通过标准曲线计算目标RNA的初始拷贝数，实现定量分析。
产品特点
操作简便：一管式反应体系，用户仅需提供RNA样本。
高灵敏度：检测下限为1.0 ng/μL（RNA），混合样本中成分检测下限为0.5%。
快速高效：全程检测时间约2小时（单样本）。
兼容性强：适用于普通PCR仪及凝胶电泳设备，无需特殊仪器。
稳定性高：优化引物设计，避免非特异性扩增。
应用范围：支持组织、细胞、血液等多种样本类型（需根据样本调整提取方法）。
试剂盒组成
荧光定量PCR预混液（含染料、dNTPs、酶等）
ECHO病毒特异性引物
阳性对照（标准品）
阴性对照
RNase-free水
说明书
实验流程
RNA提取（样本制备区）：
使用兼容的RNA提取试剂（如Trizol法或商业试剂盒），避免DNA污染。
样本建议保存于液氮、干冰或Trizol液中。
反转录（RT）：
将提取的RNA反转录为cDNA（若试剂盒未集成RT步骤，需单独进行）。
荧光定量PCR（扩增区）：
按说明书配制反应体系（示例：40 μL体系）。
设置标准曲线（稀释阳性对照）及待测样本，同步运行阴性对照。
程序：预变性（95℃, 5 min）→ 循环扩增（95℃ 10 s, 60℃ 30 s, 40循环）→ 熔解曲线分析。
数据分析：
通过阈值循环数（Ct值）和标准曲线计算RNA浓度。
熔解曲线验证扩增特异性。
注意事项
分区操作：样本制备、试剂配制、扩增需在不同区域进行，避免污染。
质量控制：每次实验需包含阴阳性对照。
样本要求：提供完整样本信息（如物种、基因名称/ID），避免直接提交降解的RNA/DNA。
适用范围：仅限科研，不适用于临床诊断。
储存与运输
保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
有效期：12个月（详见包装标签）。
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