产品特点

即开即用:预混优化试剂,用户仅需提供RNA模板。
高灵敏度与特异性:引物针对病毒高度保守区设计,避免交叉反应。
双重检测功能:支持定量(标准曲线法)和定性(Ct值判读)分析。
内控设计:含阳性对照(非传染性RNA片段),有效排除假阴性。
宽线性范围:定量检测覆盖至少5个数量级(如10²~10⁷拷贝/μL)。
产品名称 | 猪呼肠孤病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Porcine Reovirus Dye-based qRT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3166 |

操作流程

试剂准备
所有组分使用前需自然融化,涡旋混匀并短暂离心。
反应液避光保存,避免反复冻融。
标准曲线制备(定量检测适用)
按10倍梯度稀释阳性对照(如10²~10⁷拷贝/μL),独立分区操作以防污染。
标记离心管,依次加入稀释液与模板,每浓度设3复孔。
加样与扩增
反应体系:20μL/孔,含预混液、引物探针、模板RNA。
避免气泡,密封管盖,按以下程序运行:
逆转录:50℃ 15分钟
预变性:95℃ 2分钟
扩增循环(40次):95℃ 10秒 → 60℃ 30秒(采集荧光)
数据分析
定量检测:以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线,计算待测样本浓度。
定性检测:
阳性:Ct≤35,且扩增曲线典型;
阴性:Ct≥40;
可疑(35<Ct<40):需复测,复测Ct<40判为阳性。
注意事项

分区操作:样本处理、试剂配制、扩增需在独立区域完成,穿戴专用防护用具。
污染控制:使用一次性耗材,实验后以10%次氯酸或75%乙醇清洁台面及仪器。
质控要求:阴性对照Ct≥40,阳性对照Ct≤30且呈典型扩增曲线。
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关键字: 猪呼肠孤病毒;染料法荧光定量;RT-PCR试剂盒;
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