艾特韦病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 艾特韦病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Aitken Virus Dye-based qRT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3228 |
产品特点
即开即用:用户仅需提供病毒样本,无需额外配制主反应混合液。
高特异性:基于艾特韦病毒保守序列设计的引物,无交叉反应风险。
高灵敏度:检测下限可达数百拷贝/反应。
闭管检测:一管式荧光定量PCR设计,避免开盖污染。
稳定性:预混优化组分,确保结果重复性。
试剂盒组成
| 组分名称 | 规格/包装 | 备注 |
| 2×qPCR MagicMix | 500μL(棕色管) | 含荧光染料及酶 |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL(黄盖) | 用于样本稀释 |
| 艾特韦病毒PCR引物混合物 | 100μL(白盖) | 特异性引物对 |
| 阳性对照(1×10⁸拷贝/μL)| 50μL(红盖) | 标准曲线制备 |
| — | 使用手册 | 1份 | 含操作流程及注意事项 |
操作步骤
1. 样本制备
使用兼容的核酸提取试剂盒提取病毒RNA,建议采用无RNase操作环境。
2. 反应体系配制(20μL体系)
按以下比例混合:
2×qPCR MagicMix:10μL
引物混合物:1μL
模板RNA:2μL
模板稀释液:补足至20μL
3. 荧光定量PCR程序
逆转录:50℃ 15分钟(若需RT步骤);
预变性:95℃ 3分钟;
循环阶段(40 cycles):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号)。
4. 数据分析
使用仪器配套软件分析扩增曲线及Ct值,阳性对照需呈现典型S型曲线。
注意事项
分区操作:样本制备、反应配制及扩增需在独立区域进行,避免气溶胶污染。
质量控制:每批次实验需包含阴性对照(以稀释液替代模板)及阳性对照。
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融(引物混合物需分装保存)。
有效期:标注于外包装,开封后建议短期内使用完毕。
技术参数
检测限:≥200拷贝/反应
线性范围:1×10¹~1×10⁸拷贝/μL(需梯度稀释阳性对照建立标准曲线)
交叉反应:经验证与常见相关病毒无交叉。
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