产品特点

高灵敏度:采用SYBR Green染料法,可检测低至10拷贝/μL的病毒核酸。
特异性强:引物针对SFV基因组高度保守区设计,避免与其他病原体交叉反应。
操作简便:即开即用,兼容常规核酸提取试剂盒,用户仅需提供模板RNA/DNA。
双重功能:支持定性与定量分析,定量线性范围达5个数量级(10^1~10^6拷贝/μL)。
质控完善:含阳性对照(标准品)与无模板对照(NTC),有效排除假阴性/假阳性。
产品名称 | 猴泡沫病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Simian Foamy Virus RT-qPCR Kit (Dye Method) |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR2713 |

实验流程

1. 样本制备
使用商品化RNA提取试剂盒(如Trizol法)从血液、组织或细胞培养物中提取病毒RNA,建议DNase处理以去除基因组DNA污染。
2. 试剂配制(样本制备区)
解冻试剂组分(预混酶、引物、缓冲液等),离心后按比例混合(具体体积参考厂商手册)。
标准曲线制备:将阳性对照梯度稀释(建议5-6个浓度点),用于定量分析。
3. PCR扩增(扩增区)
反应程序:
逆转录(50℃ 15-30分钟)→ 预变性(95℃ 2分钟)→ 循环阶段(95℃ 15秒,60℃ 30-60秒,40循环)。
荧光信号采集:建议在延伸步骤结束时读取SYBR Green信号(FAM通道)。
4. 数据分析
阈值(Threshold)设定:以3-15循环的荧光信号标准差10倍为基线。
定量计算:通过标准曲线拟合CT值,计算样本病毒载量。
技术参数

反应体系:20μL/反应,50次检测规格
应用范围:科研用途(非临床诊断),兼容定性与定量检测
标准品制备(示例:6点梯度稀释)
标记离心管(编号7至2对应10⁷-10²拷贝/μL梯度)
使用带滤芯枪头操作,每管加入45μL专用稀释液
梯度稀释应在独立洁净区完成,避免气溶胶污染
注意事项

分区操作:严格区分样本制备区、试剂配制区和扩增区,避免气溶胶污染。
质量控制:每批次实验需包含阴性对照(NTC)以监测污染,阳性对照验证试剂活性。
适用范围:仅限科研使用,不可用于临床诊断。
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关键字: 猴泡沫病毒;染料法荧光定量;PCR试剂盒;