预期用途
本试剂盒基于SYBR Green荧光染料法，定性检测组β溶血性链球菌（Streptococcus pyogenes）的核酸，适用于临床标本（如咽拭子、伤口分泌物等）的病原学诊断及流行病学监测。
产品名称 | 组β溶血性链球菌（A组乙型溶血性链球菌）染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Group A β-hemolytic Streptococcus Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3126 |
检测原理
针对组β溶血性链球菌的特异性保守基因序列（如spy1258或emm基因）设计引物，通过实时荧光PCR扩增目标DNA。SYBR Green染料与双链DNA结合后释放荧光信号，通过仪器动态监测荧光强度，实现病原体核酸的定性检测。
试剂盒组成
预混反应液：含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及SYBR Green染料（冻干粉，复溶后单反应体系≥25μL）。
阴性质控品：无核酸酶水。
阳性质控品：含A组β溶血性链球菌靶序列的重组质粒（浓度≥1×10^3 copies/μL）。
复溶剂：用于冻干粉的溶解。
性能参数
特异性：对B/C/G组链球菌及其他常见呼吸道病原体（如肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌）无交叉反应。
灵敏度：检测下限≤500 copies/mL。
重复性：批内、批间CT值变异系数（CV）<3%。
保存条件与有效期
未复溶试剂：-20℃避光保存，有效期12个月；复溶后2-8℃保存，7天内稳定。
避免反复冻融。
操作步骤
样本处理：按规范提取样本DNA，避免RNA降解（若检测RNA需先逆转录）。
反应体系配制：复溶冻干粉后分装至八联管，加入模板DNA及对照品。
PCR程序：
预变性：95℃ 10分钟；
扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 45秒（40循环），60℃阶段采集荧光信号。
注意事项
实验分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），防止污染。
阴/阳性质控品需与样本同步检测。
反应管需瞬时离心避免气泡，密封后上机。
废弃物需经10%次氯酸或高压灭菌处理。
结果判读
阳性：扩增曲线呈S型且CT值≤35；
阴性：无扩增曲线或CT值>40（需复核）。
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