链球菌A组染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 链球菌A组染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Group A Streptococcus Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4026 |
检验原理
本试剂盒采用SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对A组β溶血性链球菌（GAS）的基因高度保守区域设计特异性引物，通过荧光信号检测实现核酸的定性及定量分析。反应体系中若存在目标核酸模板，PCR扩增将释放荧光信号，仪器实时监测并输出数据。
产品特点
即开即用：仅需提供待测DNA模板即可进行检测。
高灵敏度：优化引物设计，检测下限低至10拷贝/μL。
高特异性：引物针对GAS保守区设计，避免与其他微生物核酸交叉反应。
双重功能：支持定性和定量检测，定量线性范围达5个数量级（10^2~10^7拷贝/μL）。
内置对照：提供阳性质控品（非活体DNA片段），便于区分假阴性结果。
操作流程
样本准备
临床样本（如咽拭子、病灶分泌物）：
采集后立即置于无菌运输培养基，-80℃保存或尽快提取DNA。
血液样本：
采集2mL静脉血至EDTA抗凝管，混匀后分离血浆提取DNA。
食品/环境样本：
按微生物学标准预处理后提取核酸。
试剂配制
解冻与混匀：
试剂于冰上缓慢解冻，轻弹混匀后短暂离心（1000 rpm，10秒）。
反应体系（20μL/孔）：
预混液10μL + 引物混合液2μL + 模板DNA 5μL + RNase-free水3μL。
PCR扩增
程序设置（以ABI 7500为例）：
预变性：95℃ 5分钟；
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（荧光采集）；
熔解曲线分析：60℃~95℃，升温速率0.3℃/秒。
结果判读
定性：Ct值≤35且熔解曲线峰单一判为阳性；
定量：根据标准曲线计算拷贝数。
注意事项
实验分区操作，避免气溶胶污染。
阴性对照（NTC）需设置，以排除试剂污染。
重复实验建议≥3次，确保数据可靠性。
储存与运输
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：冰袋低温运输。
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关键字： 链球菌A组;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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