产品概述
本试剂盒专为检测棉花源性成分设计，采用染料法荧光定量PCR技术，具有高灵敏度和特异性。适用于科研实验，可快速、准确地对样品中的目标DNA进行定量分析。
产品名称 | 棉花源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Cotton-derived Component Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3139 |
产品组成
PCR反应预混液：包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及荧光染料。
阳性对照：提供标准DNA片段（非活体样品），便于实验质量控制。
荧光PCR模板稀释液：用于标准品梯度稀释。
其他辅助材料：无菌离心管、说明书等。
保存条件
储存温度：-20℃避光保存。
有效期：12个月（具体见包装标签）。
实验步骤
1. 标准品稀释（以10^2-10^7拷贝/μL为例）
标记6支离心管（7、6、5、4、3、2），每管加入45 μL荧光PCR模板稀释液。
在7号管中加入5 μL 1×10^8拷贝/μL阳性对照，震荡混匀，得1×10^7拷贝/μL标准品。
依次梯度稀释至2号管（1×10^2拷贝/μL），每次更换枪头，避免交叉污染。
2. 反应体系配制
按试剂盒说明混合以下成分（以50 μL体系为例）：
PCR预混液：25 μL
引物混合液：2 μL
模板DNA：5 μL（样品或标准品）
无核酸酶水：补足至50 μL
3. PCR程序设置
预变性：95℃ 5 min
扩增循环（40 cycles）：
95℃ 15 sec
60℃ 30 sec（荧光信号采集）
熔解曲线分析（可选）：60℃-95℃，每0.5℃采集一次荧光。
4. 数据分析
仪器自动生成Ct值，通过标准曲线计算目标DNA拷贝数。
熔解曲线用于验证扩增特异性（单峰为理想结果）。
注意事项
分区操作：标准品稀释与样品处理需在不同区域进行，避免污染。
质量控制：每批次实验需包含阴性对照（无模板对照）及阳性对照。
引物特异性：本试剂盒引物针对棉花保守序列设计，但建议验证样本兼容性。
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