产品概述

本试剂盒专为检测棉花源性成分设计,采用染料法荧光定量PCR技术,具有高灵敏度和特异性。适用于科研实验,可快速、准确地对样品中的目标DNA进行定量分析。
产品名称 | 棉花源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Cotton-derived Component Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3139 |

产品组成

PCR反应预混液:包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及荧光染料。
阳性对照:提供标准DNA片段(非活体样品),便于实验质量控制。
荧光PCR模板稀释液:用于标准品梯度稀释。
其他辅助材料:无菌离心管、说明书等。
保存条件
储存温度:-20℃避光保存。
有效期:12个月(具体见包装标签)。
实验步骤

1. 标准品稀释(以10^2-10^7拷贝/μL为例)
标记6支离心管(7、6、5、4、3、2),每管加入45 μL荧光PCR模板稀释液。
在7号管中加入5 μL 1×10^8拷贝/μL阳性对照,震荡混匀,得1×10^7拷贝/μL标准品。
依次梯度稀释至2号管(1×10^2拷贝/μL),每次更换枪头,避免交叉污染。
2. 反应体系配制
按试剂盒说明混合以下成分(以50 μL体系为例):
PCR预混液:25 μL
引物混合液:2 μL
模板DNA:5 μL(样品或标准品)
无核酸酶水:补足至50 μL
3. PCR程序设置
预变性:95℃ 5 min
扩增循环(40 cycles):
95℃ 15 sec
60℃ 30 sec(荧光信号采集)
熔解曲线分析(可选):60℃-95℃,每0.5℃采集一次荧光。
4. 数据分析
仪器自动生成Ct值,通过标准曲线计算目标DNA拷贝数。
熔解曲线用于验证扩增特异性(单峰为理想结果)。
注意事项

分区操作:标准品稀释与样品处理需在不同区域进行,避免污染。
质量控制:每批次实验需包含阴性对照(无模板对照)及阳性对照。
引物特异性:本试剂盒引物针对棉花保守序列设计,但建议验证样本兼容性。
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关键字: 棉花源性成分;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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