棉花源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 棉花源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Cotton-derived Component Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5287 |
产品基本信息
规格：50次/盒（20μL反应体系）
适用场景：科研用途（非临床诊断）
保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。
运输方式：泡沫箱加冰密封低温运输，阳性对照需单独存放。
产品特点
即开即用：用户仅需提供样品核酸模板，试剂盒预混优化引物、探针及反应体系。
高灵敏度与特异性：引物针对棉花源性成分高度保守区设计，避免与其他病毒RNA交叉反应。
双功能检测：支持定性与定量分析，定量线性范围达5个数量级（10^1–10^6拷贝/μL）。
内置对照：提供无传染性DNA片段作为阳性对照，便于区分假阴性结果。
兼容性：适配多数病毒RNA提取试剂盒，推荐配套使用柱式病毒RNAout或核酸释放剂。
操作流程
标准曲线制备
稀释阳性对照：
标记6管（6–1号），每管加45μL专用稀释液。
依次梯度稀释（10^7拷贝/μL起始），每次取5μL至下一管，震荡混匀，冰上暂存。
关键注意：操作需在独立洁净区进行，避免气溶胶污染。
样品RNA制备
设置N+2个提取（含阳性对照PC和阴性对照NC）。
使用推荐方法纯化RNA，或选用配套提取试剂。
荧光定量PCR反应
体系配置：20μL/反应，需避光操作。
标记管数：
定量分析：N+9管（样品、阴性对照、6个标准曲线点）。
定性分析：N+4管（样品、阴/阳性对照各1）。
加样顺序：优先完成样品管与阴性对照，最后处理阳性对照以防污染。
数据分析
定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样品浓度。
定性判定：
阴性：Ct≥40；阳性：Ct≤36；
临界值（36<Ct<40）需复测确认。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、加样需在不同区域进行，使用专用移液器及耗材。
质量控制：每次实验需包含阴/阳性对照，反应液避光保存，避免气泡干扰。
实验后处理：工作台及仪器需用10%次氯酸或75%酒精消毒。
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