产品简介:

产品名称 | 人白介素18(IL-18)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Human IL-18 ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A103763 |
检测目标
白介素18(IL-18)是一种促炎细胞因子,由巨噬细胞、树突状细胞等分泌,通过激活NF-κB通路参与炎症反应和Th1免疫应答。其水平升高与自身免疫病(如系统性红斑狼疮)、感染性疾病(如脓毒症)及代谢综合征相关。
检测原理
夹心法ELISA(主流):采用双抗体(捕获抗体+检测抗体)特异性结合IL-18,避免与IL-18结合蛋白(IL-18BP)交叉反应。
灵敏度:通常为5-20 pg/mL,线性范围覆盖10-2000 pg/mL(涵盖血清、血浆及组织样本)。

核心组分与操作流程

1. 试剂盒典型组分
组分 说明
预包被抗IL-18抗体板 高特异性小鼠/兔抗人IL-18单抗(靶向IL-18活性形式)
重组人IL-18标准品 浓度梯度(0-2000 pg/mL),冻干粉需复溶
生物素化检测抗体 与IL-18不同表位结合,避免与IL-1家族交叉反应(<2%)
样本稀释液 含惰性蛋白(如BSA),减少血清基质干扰
2. 简化操作步骤
样本处理:血清/血浆建议1:5稀释,组织匀浆需离心(10,000×g, 5分钟)。
孵育与检测:37℃孵育90分钟,TMB显色后450/570 nm双波长检测(减少背景干扰)。
三、技术特点与样本要求

高特异性
可区分游离IL-18与IL-18/IL-18BP复合物,适用于功能活性检测。
样本兼容性
血清/血浆(肝素抗凝更稳定)、滑膜液(需离心)、细胞上清(避免含高浓度FBS)。
稳定性
IL-18易被蛋白酶降解,样本需添加蛋白酶抑制剂并-80℃保存。
四、应用场景

临床诊断:
脓毒症早期预警(IL-18水平与器官损伤程度正相关)。
自身免疫病活动性评估(如成人Still病)。
科研领域:
炎症小体(NLRP3)激活机制研究、靶向IL-18药物开发。
五、关键注意事项
干扰因素
溶血样本释放血红素可能假性升高IL-18(建议超速离心)。
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常见问题与避坑指南:

环节 风险点 避坑建议
试剂使用 混用 严禁混用不同品牌或不同批号的试剂盒组分(如A品牌的包被板+B品牌的酶标二抗),这会导致反应体系崩溃。
终止反应 顺序 加入终止液后,溶液由蓝变黄。此时应尽快读数,因为颜色可能会随时间轻微变化。
保存 剩余板条 未用完的酶标板条,需立即密封,放入自封袋中并加干燥剂,保存于 2-8℃,避免受潮和反复冻融。
环境 污染 避免试剂接触漂白剂或含漂白剂的物质,它们会破坏酶的活性,导致实验失败。
建议:
在购买前,务必查看说明书中的“交叉反应”列表和“样本类型”说明。如果说明书宣称特异性极高(如CR0.1%),
但在你的实际样本中出现了大量假阳性,那可能需要优化洗涤步骤,或者考虑更换抗体特异性更强的试剂盒。
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