预期应用
检测目标：定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其他生物液体中的IL-23含量。
检测范围：15.6–1,000 pg/mL（通过系列倍比稀释标准品实现）。
产品名称 | 人白介素18(IL-18)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Human IL-18 ELISA Kit |
分类 | Human/人Elisa试剂盒 | 检测范围 | 31.25pg/mL-1000pg/mL |
灵敏度 | 15.625pg/mL | 货号 | PH33021 |
实验原理
采用双抗体夹心法：
包被抗体：纯化的抗IL-18抗体包被微孔板；
样本/标准品加入：与固相抗体结合；
生物素化抗体与HRP亲和素：依次加入生物素化抗IL-18抗体、HRP标记亲和素，形成复合物；
显色反应：底物TMB在过氧化物酶催化下显蓝色，加酸终止后转为黄色；
定量检测：在450nm波长测定OD值，浓度与颜色深度正相关。
试剂盒组成
| 组分 | 规格/数量 | 配制要求 |
| 酶联板 | 96孔板（1块） | 直接使用 |
| 标准品（冻干品） | 2瓶（1,000 pg/mL） | 临用前用样品稀释液稀释至1mL，静置10分钟，混匀溶解 |
| 样品稀释液 | 1×20mL | 直接使用 |
| 检测溶液A/B | 各1×120μL | 临用前按1:100比例分别用检测稀释液A/B稀释 |
| 底物溶液 | 1×10mL | 直接使用 |
| 浓洗涤液 | 1×30mL | 用蒸馏水稀释25倍（即1mL浓液+24mL水） |
| 终止液（2N H₂SO₄）| 1×10mL | 直接使用 |
| 覆膜 | 5张 | 直接使用 |
操作流程概要
标准品配制：用样品稀释液将标准品梯度稀释至目标浓度（1,000、500、250、125、62.5、31.2、15.6 pg/mL），0 pg/mL为纯稀释液。
加样与孵育：
每孔依次加入样本/标准品、生物素化抗体、HRP亲和素（具体用量参照说明书）；
各步骤间使用稀释后的洗涤液充分洗涤。
显色与终止：
每孔加TMB底物溶液，避光反应；
加终止液后15分钟内测定OD值。
结果计算：
以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线；
根据样本OD值在曲线上推算IL-23浓度。
注意事项
仅供体外研究使用。
自备设备：酶标仪（预热至稳定）、微量加液器、吸头、EP管、蒸馏水。
试剂稳定性：检测溶液A/B需在使用前1小时内配制。
样本处理：避免反复冻融，血浆样本需使用EDTA或肝素抗凝。
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