绵羊肺腺瘤病病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Jaagsiekte Sheep Retrovirus (JSRV) Dye-based qRT-PCR Kit
规格
50T
货号
PR3242
性能参数
灵敏度：检测下限可达100拷贝/反应。
特异性：引物针对JSRV高度保守区设计，无交叉反应。
线性范围：定量检测时覆盖5个数量级（需通过标准曲线验证）。
检测原理
基于荧光定量RT-PCR技术，通过SYBR Green等染料与双链DNA结合产生荧光信号，实时监测扩增过程，结合Ct值对目标RNA进行定性或定量分析。
操作步骤
RNA提取：需自备样品RNA，建议使用无RNase污染的提取试剂。
反应体系配制：按说明书比例混合试剂、引物、模板及酶混合物。
PCR扩增：
逆转录：50℃ 15分钟（可选，部分试剂盒含一步法RT-PCR）。
预变性：95℃ 2分钟。
循环阶段：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40个循环，采集荧光信号）。
数据分析：
定性检测：Ct值≤30为阳性，≥34为阴性；30<Ct<34需复测。
定量检测：通过标准曲线计算样品浓度。
质量控制
阴性对照：Ct值应≥36或无扩增曲线。
阳性对照：需有明显扩增曲线且Ct值≤30。
注意事项
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。
操作需在无核酸污染的环境中进行，建议分区操作。
避免反复冻融试剂，解冻后需充分混匀。
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