羊肺腺瘤病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 羊肺腺瘤病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Ovine Pulmonary Adenocarcinoma Virus Dye-based qRT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4312 |
检测原理
本试剂盒基于荧光定量RT-PCR技术，采用染料法（如SYBR Green）实时检测羊肺腺瘤病毒（JSRV）的RNA。通过逆转录将病毒RNA转化为cDNA，再通过PCR扩增目标基因片段，荧光信号与扩增产物量成正比，实现定量或定性分析。
性能参数
灵敏度：可检测低至100拷贝/反应的病毒RNA。
特异性：引物针对JSRV高度保守区设计，不与羊其他病原体交叉反应。
线性范围：定量检测时，覆盖至少5个数量级（10^1~10^5拷贝/μL）。
操作步骤
RNA提取：使用配套或自备RNA提取试剂制备样本RNA。
逆转录：将RNA模板逆转录为cDNA（若试剂盒含RT步骤，按说明操作）。
荧光定量PCR：
反应体系：20μL/反应（含预混液、引物、模板cDNA）。
循环条件：95℃预变性2分钟；95℃ 15秒→60℃ 30秒（40个循环）。
数据分析：
定性检测：Ct值≤30判为阳性，≥34判为阴性；30<Ct<34需重复检测。
定量检测：通过标准曲线计算样本中病毒RNA浓度。
质量控制
阳性对照：试剂盒提供，Ct值应≤30且扩增曲线典型。
阴性对照：无模板对照（NTC）Ct值应≥36或无扩增。
注意事项
仅限科研使用，不可用于临床诊断。
操作需在无菌环境下进行，避免RNA降解。
不同荧光定量PCR仪器（如ABI、Bio-Rad等）需调整参数至兼容。
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