禽痘病毒染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 禽痘病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Avian Poxvirus Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3248 |
产品用途
用于禽痘病毒(Avianpoxvirus, APV)的快速、灵敏定性及定量检测,适用于科研领域。
产品特点
即开即用:用户仅需提供DNA模板,试剂盒包含预混PCR反应液,简化操作流程。
高特异性:引物针对禽痘病毒基因组保守区设计,避免与其他病毒或宿主DNA交叉反应。
灵敏度高:检测下限可达10^2拷贝/μL,线性范围覆盖5个数量级(10^2~10^7拷贝/μL)。
质量控制:提供阳性对照(1×10^8拷贝/μL),便于区分假阴性结果。
兼容性:适配多数核酸提取试剂盒,支持20–50μL反应体系(50次检测)。
规格及成分
| 成分编号 | 名称及规格 |
| 1 | PCR预混液(含荧光染料,40μL/次×50次) |
| 2 | 禽痘病毒特异性引物混合液(100μL) |
| 3 | 阳性对照(1×10^8拷贝/μL) |
| 4 | DEPC-H2O(1mL) |
操作步骤
1. DNA提取
使用兼容的核酸提取试剂盒制备样本DNA,建议浓度≥50ng/μL。
2. 标准曲线制备(定量检测适用)
将阳性对照按10倍梯度稀释(10^7~10^2拷贝/μL),每个梯度设3个复孔。
操作需在独立区域进行,避免交叉污染。
3. PCR反应体系配制
每20μL反应体系:10μL预混液 + 2μL引物混合液 + 2μL模板DNA + 6μL DEPC-H2O。
阴性对照:以DEPC-H2O替代模板DNA。
4. 荧光定量PCR程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 3min | 1 |
| 扩增 | 95℃ 10s → 60℃ 30s(采集荧光) | 40 |
| 溶解曲线分析 | 95℃ 15s → 60℃ 1min → 95℃ 15s | 1 |
结果判读
定性检测:Ct值≤35且溶解曲线为单一峰,判为阳性。
定量检测:根据标准曲线计算样本拷贝数。
注意事项
本产品仅限科研使用,不可用于临床诊断。
试剂保存于-20℃,避免反复冻融(有效期12个月)。
实验分区操作(样本制备区、PCR反应区),防止污染。
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