河豚鱼源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒

产品特点

即开即用：用户仅需提供样品模板，预混反应体系包含优化引物、探针及缓冲液。

高灵敏度与特异性：

引物针对河豚鱼DNA高度保守区设计，避免与其他物种发生交叉反应。

检测线性范围达5个数量级，最低检测限≤10拷贝/μL。

双重检测功能：支持定性与定量分析，配套标准曲线样品（10^2~10^7拷贝/μL）。

质控保障：提供无传染性DNA片段作为阳性对照，排除假阴性干扰。

操作方法

标准曲线制备（以10^2~10^7拷贝/μL为例）

标记稀释管：标记6管为2~7号，各加45 μL专用模板稀释液。

梯度稀释：

7号管加入5 μL阳性对照（1×10^8拷贝/μL），震荡混匀，得到10^7拷贝/μL标准品。

依次稀释至10^2拷贝/μL（6号至2号管）。

注意事项：

操作需在独立洁净区进行，避免气溶胶污染。

使用带滤芯枪头，防止交叉污染。

PCR反应体系

反应体积：20 μL（含预混酶、染料、引物探针混合液）。

程序设置：按仪器要求优化退火温度（建议60~65℃），循环数40~45次。

注意事项

样本处理：

组织样本需匀浆离心取上清，避免颗粒物干扰。

长期保存需分装于-20℃，避免反复冻融。

实验质控：

每批次实验需包含阴性对照（无模板水）及阳性对照。

若Ct值＞35，建议重复检测或提高模板浓度。

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