腰果源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术，专用于食品及原料中腰果源性成分的定性检测。通过特异性引物扩增腰果保守核酸序列，结合荧光染料（如SYBR Green）实时监测扩增信号，实现高灵敏度、高特异性的检测。

核心特性

高灵敏度：可检测低至几百拷贝/反应的腰果源性核酸。

高特异性：引物针对腰果特有序列设计，避免与其他物种交叉反应。

便捷性：即开即用，含预混反应液（除模板DNA和ROX参比染料外）。

防污染设计：一管式闭管检测，减少气溶胶污染风险。

组分清单

每盒包含以下成分（50次反应）：

2×荧光定量PCR预混液（含染料）

腰果源性特异性引物混合液

阴性对照（无核酸酶水）

阳性对照（腰果源性DNA片段）

需自备：

DNA模板（建议使用配套提取试剂盒）

10×ROX参比染料（依机型需求，参见附录）

操作流程

模板制备：

使用DNA提取试剂盒从样品中提取基因组DNA，浓度建议10-100 ng/μL。

反应体系配置（冰上操作）：

预混液         10 μL  

引物混合液     2 μL  

模板DNA       5 μL  

ROX染料       0.4 μL（依机型调整）  

无核酸酶水    补至20 μL  

PCR扩增程序：

预变性：95℃ 10分钟

循环阶段（45个循环）：

95℃ 15秒（变性）

58℃ 1分钟（退火/延伸，荧光采集）

数据分析：

定性判定：

Ct值≤35：阳性（检出腰果成分）

Ct值≥40：阴性

35<Ct值<40：建议重复检测。

定量分析（需标准品）：通过标准曲线计算模板浓度。

注意事项

避免反复冻融试剂，分装后使用。

操作时需穿戴防护装备，防止核酸污染。

不同仪器需优化ROX染料浓度（参考仪器说明书）。

应用范围

适用于植物蛋白饮料、烘焙食品、调味酱料等中腰果成分的检测，符合食品安全监管需求。

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