产品名称 | 酵母菌属通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Yeast Genus Universal Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3162 |
试剂盒组成
2×SYBR qPCR MasterMix：0.5 mL/管（50次反应，20 μL体系）
荧光PCR专用模板稀释液：1 mL/管
超纯水：1 mL/管（用于稀释或对照设置）
染料法qPCR引物混合液：100 μL/管（针对酵母菌属保守序列设计，特异性高）
qPCR阳性对照（1×10^7 拷贝/μL）：50 μL/管
使用说明书：1份
注意事项：
不同批号试剂组分不可混用。
运输及保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
实验操作指南
1. 样品制备
样本数量：若检测N个样品，需额外设置2个对照（N+2），包括：
阳性对照（PC）：使用试剂盒提供的阳性对照（10 μL，1×10^6 拷贝/μL）加水至与样本体积一致。
阴性对照（NC）：以超纯水替代模板。
DNA提取：兼容多数细菌DNA提取试剂盒，需自备纯化试剂。
2. PCR反应体系（20 μL）
| 组分 | 体积（μL） |
| 2×SYBR MasterMix | 10 |
| 引物混合液 | 0.4 |
| 模板DNA | 2-5 |
| 超纯水 | 补至20 |
3. 反应程序
预变性：95℃ 3分钟
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）
熔解曲线分析：60℃至95℃，每0.5℃递增，验证扩增特异性。
性能参数
灵敏度：可检测低至100拷贝/反应的酵母菌DNA。
特异性：引物针对酵母菌属高度保守区设计，无交叉反应。
线性范围：定量检测时覆盖5个数量级（10^2-10^7 拷贝/μL）。
注意事项
避免试剂污染，推荐在超净台或PCR工作站中操作。
熔解曲线出现多峰需排查非特异性扩增。
本产品仅限科研使用，不适用于临床诊断。
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