禽正呼肠孤病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

产品基本信息

检测方法：染料法荧光定量RT-PCR

规格：50T（50次20μL体系反应）

存储条件：-20℃避光保存

保质期：未开封状态下12个月

用途：科研使用，不可用于临床诊断

产品特点

即开即用：用户仅需提供样品DNA模板，操作简便。

高灵敏度：引物及反应体系经优化，可检测低拷贝数病毒核酸。

内控设计：提供阳性对照，有效排除假阴性结果。

高特异性：引物基于病毒高度保守区设计，避免与其他病原核酸交叉反应。

双重功能：支持定性和定量检测，定量线性范围达5个数量级。

试剂盒组成

PCR反应液：含预混荧光染料、dNTPs、Mg²⁺等（具体体积见包装标注）。

阳性对照：已知浓度的禽正呼肠孤病毒核酸（1×10⁶拷贝/μL）。

阴性对照：DEPC-H₂O或无核酸酶水。

说明书：详细实验步骤及数据分析方法。

操作流程

样本处理：提取待检样品RNA，建议使用商品化RNA提取试剂盒。

标准曲线制备（定量检测适用）：

将阳性对照梯度稀释（10⁶至10¹拷贝/μL），每个浓度点重复3次。

反应体系配制：

每20μL反应体系包含：PCR反应液18μL，模板RNA 2μL。

扩增程序：

参照仪器兼容程序（如ABI、Bio-Rad等机型），通常包括逆转录（50℃ 15min）、预变性（95℃ 5min）、40个循环的变性/退火/延伸（95℃ 10s→60℃ 30s）。

结果分析：

定性：Ct值≤35且扩增曲线呈S"形判为阳性。

定量：根据标准曲线计算病毒拷贝数。

注意事项

避免反复冻融试剂，开封后建议分装保存。

实验分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），防止污染。

不同批号试剂不可混用。

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