肾综合症出血热病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 肾综合症出血热病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Hantavirus Dye-based qRT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3267 |
产品概述
本试剂盒采用染料法荧光定量RT-PCR技术，专用于**肾综合症出血热病毒（HFRSV）**的核酸定性检测，适用于科研实验（不可用于临床诊断）。通过特异性引物与荧光染料结合，实现对病毒RNA的高灵敏度、高特异性扩增与定量分析，检测限可达数百拷贝/反应。
适用样本：病毒RNA提取物（需自备DNA模板及10×ROX参照染料）。
试剂盒组成
| 成分 | 包装规格 |
| 2×qPCR MagicMix | 500 μL（棕色管） |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） |
| HFRSV PCR引物混合物 | 100 μL（白盖） |
| HFRSV PCR阳性对照（1×10⁸ 拷贝/μL） | 50 μL（红盖） |
| 使用手册 | 1份 |
操作步骤
1. 阳性对照稀释
注意：需在独立区域操作，避免交叉污染。
取6支离心管，依次标记为2–7号，每管加入45 μL模板稀释液。
于7号管加入5 μL阳性对照（1×10⁸ 拷贝/μL），涡旋混匀，得1×10⁷ 拷贝/μL梯度。依次稀释至2号管（1×10² 拷贝/μL）。
2. 反应体系配制
每20 μL反应体系包含：
2×qPCR MagicMix：10 μL
引物混合物：1 μL
模板DNA/稀释阳性对照：5 μL
ROX染料（按机型需求添加）
补足无核酸酶水至20 μL。
3. PCR程序设置
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
| 扩增 | 95℃ | 15 sec | 30 |
| 退火/延伸 | 57℃ | 15 sec |
| 延伸 | 72℃ | 40 sec |
| 终延伸 | 72℃ | 10 min | 1 |
4. 结果分析
使用荧光定量PCR仪采集扩增曲线与Ct值，通过标准曲线计算样本病毒载量。
阴性对照：无扩增曲线；阳性对照：Ct值≤35且呈典型S型曲线。
注意事项
实验需在无菌环境下操作，避免RNA降解及污染。
阳性对照为DNA片段，不可直接接触活体病毒样本。
若样本无扩增，建议稀释10倍后复测以排除抑制剂干扰。
本产品仅限科研用途，临床诊断需经国家批准试剂盒。
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