白斑综合症病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

白斑综合症病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于TaqMan探针法实时荧光定量PCR技术，专用于检测白斑综合症病毒（WSSV）核酸。采用高特异性引物及探针，针对WSSV基因保守区域设计，实现闭管操作，降低污染风险，适用于科研用途（非临床诊断）。

检验原理

通过荧光定量PCR技术扩增WSSV核酸模板，反应体系中探针与靶序列结合后释放荧光信号，仪器实时监测荧光强度并输出Ct值，实现定性或定量分析。

试剂组成

WSSV扩增液：100 μL×1管

WSSV反应液：900 μL×1管

WSSV阳性质控品：50 μL×1管（含已知浓度WSSV核酸）

WSSV阴性质控品：50 μL×1管（无核酸模板）

操作步骤

样本准备：提取待测样本DNA，建议使用纯化后的病毒核酸模板。

反应体系配制：

每20 μL反应体系包含：16 μL WSSV反应液、2 μL WSSV扩增液、2 μL模板DNA。

阴/阳性质控品需同步设置。

PCR扩增：

将反应管置于荧光定量PCR仪，按以下程序运行：

UNG处理：37℃ 2分钟（消除残留污染）

预变性：95℃ 3分钟

扩增循环（40次）：95℃ 5秒 → 55℃ 40秒（此阶段采集FAM通道荧光信号）

结果判读：

阳性对照：Ct值≤35且扩增曲线呈S型。

阴性对照：Ct值＞38或无扩增曲线。

样本判定：

阳性：Ct值≤35或明显指数增长。

可疑：Ct值35~38需复测，复测后仍在此范围且曲线正常则判为阳性。

性能参数

灵敏度：可检测低至10拷贝/μL的WSSV核酸。

特异性：引物及探针经严格验证，无交叉反应。

反应次数：50次/盒（20 μL体系）。

注意事项

实验需在分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区）内完成，避免污染。

试剂开封后需短暂离心，避免液体挂壁。

可疑结果建议结合熔解曲线分析或重复检测。

储存与运输

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

有效期：12个月（生产日期见包装标签）。

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