人泛素(Ub)ELISA试剂盒
产品简介:
人泛素（Ub）ELISA试剂盒用于定量检测人体样本（如血清、血浆、细胞裂解液等）中的泛素蛋白水平，是研究蛋白质降解、细胞信号转导及相关疾病的重要工具。泛素是一种小分子蛋白质，通过泛素化过程标记其他蛋白质，调控其降解、定位和活性，在细胞周期、DNA修复、免疫反应等生理过程中发挥关键作用。
英文名称 | Human Ub ELISA Kit | 产品类别 | Human/人Elisa试剂盒 |
货号 | A103230 | 规格 | 48T/96T |
灵敏度 | 3.125ng/mL | 检测范围 | 6.25ng/mL-400ng/mL |
检测原理
采用双抗体夹心法ELISA技术：
微孔板预包被抗泛素抗体，捕获样本中的泛素蛋白；
加入生物素标记的抗泛素抗体，结合已捕获的泛素；
加入HRP标记的链霉亲和素，形成“抗体-泛素-检测抗体”复合物；
加入TMB底物，酶催化显色，颜色深浅与泛素浓度正相关，通过酶标仪测定吸光度（OD值）计算浓度。
核心组件
预包被抗体板：已包被抗泛素抗体的96孔板；
标准品：不同浓度的重组或天然泛素蛋白，用于绘制标准曲线；
检测抗体：生物素标记的抗泛素抗体；
酶标记物：HRP标记的链霉亲和素；
底物溶液：TMB显色液；
终止液：用于终止反应，通常为硫酸溶液。
检测流程
加样：加入标准品、样本和检测抗体；
温育：促进抗原抗体反应；
洗涤：去除未结合成分；
显色：加入底物溶液，观察颜色变化；
终止：加入终止液，停止反应；
读数：酶标仪测定OD值，计算泛素浓度。
应用价值
蛋白质降解研究：泛素化是蛋白质降解的主要机制，检测泛素水平有助于研究细胞内蛋白质质量控制及降解途径。
疾病机制研究：泛素化异常与神经退行性疾病（如阿尔茨海默病）、癌症、免疫疾病等密切相关，可作为潜在的生物标志物或治疗靶点。
药物研发：筛选和评估针对泛素-蛋白酶体系统（UPS）的药物，如去泛素化酶（DUBs）抑制剂或蛋白酶体抑制剂。
人泛素（Ub）ELISA试剂盒操作简便、灵敏度高、特异性强，为泛素化相关研究、疾病机制探索及药物开发提供可靠支持。
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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
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