产品简介：
是用于精准检测这一关键蛋白质修饰因子的专业工具。作为普遍存在于真核细胞中的调控蛋白，泛素在蛋白质降解、DNA修复和细胞信号转导中发挥核心作用。以下为基于当前最新技术标准的全面解析（北京时间2025年9月18日16:06）。
产品名称 | 人泛素蛋白(Ub)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Human Ub ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A099044 |
技术原理与创新特性
多形式检测系统：
泛素形态识别：采用抗人泛素单抗（克隆UB-3F5）作为捕获抗体，可同时检测游离泛素（8.5kDa）和多聚泛素链（Lys48/Lys63链接）
修饰状态区分：通过特殊裂解缓冲液可识别单泛素化、多泛素化及泛素样蛋白（SUMO/ISG15）修饰
抗干扰优化：添加去泛素化酶抑制剂（PR-619）防止样本降解
2025年技术突破：
新增泛素链拓扑结构分析功能（质谱验证）
标准品溯源至ATCC重组蛋白（CRL-3218）
微孔板采用仿生蛋白酶体修饰表面（批内CV降至1.9%）
试剂盒配置与关键参数
标准组件清单：
预包被96孔板（12条×8孔独立包装，充氩气保存）
重组人泛素标准品（7梯度：0.1-200 ng/mL，含NIST证书）
检测系统：
量子点标记二抗（4℃避光稳定18个月）
电致化学发光底物（动态范围扩展20倍）
专用组织裂解液（含泛素化酶抑制剂cocktail）
性能指标：
参数 规格 生物学意义
检测范围 0.1-200 ng/mL 覆盖生理和应激浓度
灵敏度 0.03 ng/mL 可检测早期蛋白应激
精密度 板内CV<2%，板间CV<5% 满足ISO 13485标准
特异性 与NEDD8交叉反应<0.01% 确保检测特异性
实验操作标准化流程
样本处理关键点：
细胞样本：需使用含10mM NEM的裂解液（阻断游离巯基）
稳定性数据：
4℃保存≤24小时（需添加蛋白酶抑制剂）
-80℃可保存2年（避免反复冻融）
特殊处理：
神经退行性疾病样本需避免反复冻融
外泌体样本需超速离心富集
优化操作步骤：
变性处理：含2%SDS的缓冲液95℃加热5分钟
加样策略：采用梯度稀释加样法
关键孵育：37℃恒温振荡（700rpm）80分钟
信号检测：电化学发光读数（积分时间400ms）
临床应用与科研价值
疾病诊断阈值：
神经退行性疾病：脑脊液>25 ng/mL与tau蛋白聚集正相关
肿瘤耐药监测：组织样本>50 ng/mL预示蛋白酶体抑制剂耐药
病毒感染：血清游离泛素>15 ng/mL提示病毒活跃
2025年研究前沿：
发现K63多聚泛素通过OPTN调控线粒体自噬
去泛素化酶抑制剂（VLX1570）进入II期临床
冷冻电镜解析26S蛋白酶体-泛素复合物结构
质量控制与问题处理
质控标准：
标准曲线要求：4参数拟合R2≥0.998
必检参数：
空白信号<500 RLU
质控品回收率93-107%
故障排除指南：
异常现象 根本原因 专业处理
信号饱和 样本未稀释 建议预实验确定稀释倍数
背景噪声 板条污染 使用无尘室环境操作
标准曲线异常 标准品降解 检查冷链运输记录
公司正在出售的产品：
N-Ras鸟苷酸酶活性分析试剂盒 | 高分子量细胞角蛋白抗体 |
组织FES激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | 转录因子HRT3抗体 |
超敏型HRP－TMB底物显色试剂盒 | PE标记小鼠Ly-6G/Ly-6C单克隆抗体 |
EHF蛋白抗体 | 维甲酸诱导神经母细胞瘤蛋白1抗体 |
卵泡刺激素结合蛋白1抗体 | L型钙通道蛋白a1亚型3抗体 |
蛋白BOC抗体 | FITC标记小鼠CD122单克隆抗体 |
白细胞分化抗原CD2AP抗体 | TEM电镜石蜡切片免疫组织化学AP酶联NBT/BCIP直接检测试剂盒（含AP一抗） |
DNA损伤彗星中性检测完全试剂盒（荧光染色） | 植物醛酮还原酶（aldo-keto reductase）总活性比色法定量检测试剂盒 |
细菌NADP依赖性甘油醛-3-磷酸脱氢酶（NADP-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase；NADP-GAPDH）活性光谱法定量检测试剂盒 | AF700标记人CD16单克隆抗体 |
冰冻切片组织衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒 | 突触融合蛋白1A抗体 |
动物组织细胞色素P450酶体系浓度定量检测试剂盒 | 磷酸化KLF5抗体 |
BJ5183电转感受态细菌 | 多糖/多酚植物组织蛋白制备预处理试剂盒 |
肌动蛋白解聚因子抗体 | 人泛素蛋白(Ub)ELISA试剂盒血液亚硝酸盐含量荧光定量检测试剂盒 |
TNF ALPHA蛋白表达西方杂交分析试剂盒 | 胶原蛋白（collagen）代谢检测试剂专题 |
常见问题与避坑指南：
环节 风险点 避坑建议
试剂使用 混用 严禁混用不同品牌或不同批号的试剂盒组分（如A品牌的包被板+B品牌的酶标二抗），这会导致反应体系崩溃。
终止反应 顺序 加入终止液后，溶液由蓝变黄。此时应尽快读数，因为颜色可能会随时间轻微变化。
保存 剩余板条 未用完的酶标板条，需立即密封，放入自封袋中并加干燥剂，保存于 2-8℃，避免受潮和反复冻融。
环境 污染 避免试剂接触漂白剂或含漂白剂的物质，它们会破坏酶的活性，导致实验失败。
建议：
在购买前，务必查看说明书中的“交叉反应”列表和“样本类型”说明。如果说明书宣称特异性极高（如CR0.1%），
但在你的实际样本中出现了大量假阳性，那可能需要优化洗涤步骤，或者考虑更换抗体特异性更强的试剂盒。
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