人基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA试剂盒
产品简介:
人基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA试剂盒用于定量检测人体样本（如血清、血浆、细胞培养上清液等）中的TIMP-3水平。TIMP-3是基质金属蛋白酶（MMPs）的天然抑制剂，参与调控细胞外基质的降解，在组织重塑、炎症反应、肿瘤侵袭和血管生成等生理和病理过程中发挥重要作用。
英文名称 | Human TIMP-3 ELISA Kit | 产品类别 | Human/人Elisa试剂盒 |
货号 | A113974 | 规格 | 48T/96T |
灵敏度 | 62.5pg/mL | 检测范围 | 125pg/mL-4000pg/mL |
检测原理
双抗体夹心法ELISA：微孔板预包被抗TIMP-3抗体，样本中的TIMP-3与生物素化的检测抗体结合，再与HRP标记的链霉亲和素反应，加入TMB底物后显色，颜色深浅与TIMP-3浓度呈正相关，酶标仪在450 nm波长处读数。
主要组成
预包被酶标板（96/48孔）
TIMP-3标准品（多个浓度梯度）
生物素化检测抗体
HRP标记链霉亲和素
底物溶液（TMB）、终止液（硫酸）
洗涤缓冲液、样本稀释液、封板膜等辅助试剂
检测流程
加样：标准品/样本+生物素化检测抗体+HRP标记链霉亲和素
洗涤：每孔加满洗涤液，重复5次
显色：加入底物溶液，避光反应10-15分钟
终止：加入终止液
读数：酶标仪450 nm波长测定OD值
性能指标
检测范围：通常为62.50-4000 pg/mL（具体以说明书为准）
灵敏度：低检出限小于37.50 pg/mL
特异性：仅与人类TIMP-3反应，不与其他相关蛋白交叉反应
重复性：板内变异系数≤10%，板间变异系数≤15%
临床与研究意义
肿瘤研究：TIMP-3通过抑制MMPs活性，调控肿瘤细胞侵袭和转移，其表达水平与肿瘤进展和预后相关。
炎症与纤维化研究：TIMP-3参与调控炎症反应和组织纤维化过程，可作为相关疾病机制研究的潜在标志物。
血管生成研究：TIMP-3具有抗血管生成作用，在眼科疾病（如脉络膜新生血管）等研究中具有重要意义。
样本要求
血清/血浆：避免溶血和反复冻融。
其他样本：如细胞培养上清液，需经适当处理和稀释。
注意事项
试剂盒需2-8℃保存，有效期一般为6个月。
实验前平衡至室温，严格按照说明书操作。
建议设空白对照、标准曲线和样本复孔，确保结果准确可靠。
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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
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