小鼠基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA试剂盒
产品特点:
高灵敏度：最低检测浓度可达1.0 pg/mL以下。
高特异性：不与其他结构类似物交叉反应。
重复性好：板内和板间变异系数均小于15%。
操作简便：采用双抗体夹心法，步骤清晰。
英文名称 | Mouse TIMP-3 ELISA Kit | 产品类别 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A105319 | 规格 | 48T/96T |
检测原理
试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。预先包被抗TIMP-3捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品和HRP标记的检测抗体。经过温育和洗涤后，加入底物TMB显色，颜色深浅与样本中TIMP-3浓度正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算浓度。
适用样本
血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等。
试剂盒组成
预包被微孔板
标准品（已知浓度的TIMP-3溶液）
HRP标记的检测抗体
底物液A和B
终止液
洗涤缓冲液
封板膜
说明书。
操作步骤
准备试剂和样本：试剂盒平衡至室温，样本按规定处理。
加样：设置标准品孔和样本孔，加入相应液体。
温育：封板后37℃温育60分钟。
洗涤：彻底洗涤微孔，去除未结合物质。
显色：加入底物液，避光孵育15分钟。
终止：加入终止液，终止显色反应。
测定：用酶标仪在450nm波长下测定OD值。
注意事项
样本处理：避免反复冻融，血清/血浆需防止溶血。
试剂保存：2-8℃避光保存，有效期6个月。
实验环境：保持恒温，避免温度波动影响结果。
安全防护：操作时穿戴实验服、手套和护目镜，避免接触试剂。
应用领域
科研研究：用于研究TIMP-3在疾病机制、病理生理过程中的作用。
药物开发：评估药物对TIMP-3表达的影响。
生物标志物检测：探索TIMP-3作为疾病诊断或预后标志物的潜力。
性能参数
灵敏度：最低检测限小于1.0 pg/mL。
线性范围：通常为0-400 pg/mL。
特异性：不与小鼠其他细胞因子交叉反应。
重复性：板内变异系数≤10%，板间变异系数≤15%。
注意事项
严格按照说明书操作，避免交叉污染和非特异性结合。
样本避免反复冻融，未用完的板条密封冷藏（2-8℃）保存。
试剂盒组分不可混用，标准品建议一次性使用。
血浆、血清及组织样本需规范处理，避免溶血和杂质干扰。
该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点，是兔MIP-3α/CCL20定量检测及相关疾病机制研究的可靠工具，广泛应用于兔免疫、炎症、感染等领域的科研。
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”？
A: 建议每个样本（包括标准品）都做复孔（2-3个孔）。这样可以计算平均值，减少操作误差，提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗？
A: 是的。如果样本浓度过高，超出了标准曲线的检测范围，需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时，记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”（背景不均）怎么办？
A: 可能原因包括：洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂（如底物）受光照分解。请检查洗板机是否堵塞，确保温育箱温度恒定。
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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
关键字： 小鼠;TIMP-3;ELISA试剂盒;
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