产品原理
本试剂盒基于SYBR Green染料法荧光定量PCR技术，通过嵌合双链DNA的SYBR Green染料实时监测扩增产物。随着PCR循环进行，染料与扩增产物结合后荧光信号增强，通过检测荧光强度变化实现对目标RNA/DNA的定量分析。
产品名称 | 牛皮蝇蛆染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Hypoderma bovis Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3348 |
产品特点
高灵敏度：优化的引物设计可特异性扩增牛皮蝇蛆（Hypoderma bovis）保守序列，避免与其他病原体交叉反应。
反转录高效性：采用进口M-MLV反转录酶，可生成长链cDNA，保留完整基因信息。
操作便捷：预混缓冲液与酶体系，用户仅需提供RNA模板即可完成反转录及PCR扩增。
质量控制：含RNase抑制剂，降低外源污染风险；提供阳性对照以排除假阴性。
试剂盒组成
| 成分 | 规格/含量 |
| RT-PCR缓冲液 | 500 μL |
| M-MLV反转录酶 | 100 μL |
| SYBR Green PCR Mix | 1 mL |
| 牛皮蝇蛆特异性引物 | 100 μL |
| 阳性对照（cDNA） | 50 μL |
| RNase-free水 | 1 mL |
实验流程
RNA提取：使用无RNase污染的试剂提取样品RNA。
反转录：20 μL体系（含RNA模板、缓冲液、M-MLV酶），42℃反应15分钟。
qPCR扩增：50 μL体系（含cDNA、SYBR Green Mix、引物），按以下程序运行：
预变性：95℃ 5分钟
循环阶段（40次）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）
数据分析：通过标准曲线或Ct值计算模板初始浓度。
注意事项
避免污染：操作时需使用无RNase/DNase耗材，分区处理样本。
质量控制：阳性对照需出现预期扩增曲线，阴性对照无信号。
重复实验：若样本无扩增，建议稀释后重复以排除抑制剂干扰。
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关键字： 牛皮蝇蛆;染料法荧光定量;PCR试剂盒;