人肤蝇染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Dermatobia hominis Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR4574
产品概述
本试剂盒专用于人肤蝇(Dermatobia hominis)的荧光定量PCR检测,基于染料法技术,适用于科研用途。产品包含优化引物、阳性对照及反应体系所需组分,具有高灵敏度和特异性,可同时支持定性和定量分析(线性范围≥5个数量级)。
规格与组分
规格:50次(20μL体系/次)
主要组分:
预混PCR反应液(含染料)
人肤蝇特异性引物及探针
阳性对照(无传染性DNA片段,1×10^8拷贝/μL)
荧光PCR专用模板稀释液
阴性对照
操作步骤
样本准备
样本处理需在独立洁净区进行,避免交叉污染。
使用带滤芯枪头操作,确保无气溶胶污染。
标准曲线制备(以10^2-10^7拷贝/μL梯度为例)
标记6管,分别加入45μL稀释液。
取5μL阳性对照加入第7管,震荡混匀,得到10^7拷贝/μL标准品,依次梯度稀释至10^2拷贝/μL。
PCR反应体系配制
按说明书比例混合反应液、引物、模板DNA,避光操作。
短暂离心去除气泡,确保管盖密闭。
上机检测
设置荧光定量PCR程序:预变性(95℃, 2min)→循环阶段(95℃ 10s, 60℃ 30s,40 cycles)。
注意事项
储存与稳定性:组分需-20℃避光保存,使用前完全融解并混匀。
防污染措施:
实验分区操作(样本处理、试剂配制、扩增区分开)。
实验后使用10%次氯酸或75%乙醇消毒台面及仪器。
生物安全:所有废弃物按《微生物生物医学实验室生物安全通则》处理。
质量控制
阳性对照:用于验证反应体系有效性,排除假阴性。
阴性对照:监测污染情况。
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