锦鲤疱疹病毒染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Koi Herpesvirus (KHV) Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR3469
检验原理
本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对锦鲤疱疹病毒Sph基因（KHV）高度保守区域设计特异性引物。在PCR扩增过程中，SYBR Green染料与双链DNA结合释放荧光信号，通过仪器实时监测荧光强度变化，实现对KHV核酸的定性和定量分析。
试剂盒组成
PCR MagicMix 3.0（含Taq酶、dNTPs、缓冲液及SYBR Green染料）——1 mL
超纯水（无核酸酶）——1 mL
KHV Sph基因特异性引物混合液——100 μL
KHV阳性对照（1×10^8拷贝/μL）——50 μL
核酸释放剂（试用装）——1 mL（20次用量）
使用手册——1份
储存与运输
储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月；阳性对照需单独存放，避免污染。
运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。
操作步骤
样本处理：使用核酸释放剂提取待测样本DNA。
反应体系配置（40μL/反应）：
PCR MagicMix 3.0：20 μL
引物混合液：2 μL
DNA模板：5 μL
超纯水：补足至40 μL
（阳性对照需单独设置反应管）
扩增程序（以主流qPCR仪为例）：
预变性：95℃ 5分钟
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）
结果判读：
阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈典型S型。
阴性：无扩增曲线或Ct值≥40。
注意事项
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。
操作需在无菌环境下进行，避免交叉污染。
试剂解冻后需充分混匀，避免反复冻融。
实验需设置阴性对照（超纯水替代模板）和阳性对照。
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