金黄地鼠白血病病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 金黄地鼠白血病病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Golden Hamster Leukemia Virus Dye-based qRT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3470 |
产品特点
即开即用：预混优化试剂，仅需提供样品DNA模板。
高灵敏度：引物针对病毒高度保守区设计，检测限低至几百拷贝/反应。
特异性强：与其他微生物DNA/RNA无交叉反应。
双重检测功能：支持定性与定量分析，定量线性范围达5个数量级（10^2~10^7拷贝/μL）。
内置对照：提供无传染性DNA片段作为阳性对照，避免假阴性干扰。
试剂盒组分
荧光PCR预混液（含染料、dNTPs、聚合酶等）
阳性对照（1×10^8拷贝/μL DNA片段）
阴性对照（无核酸酶水）
荧光PCR专用模板稀释液
使用说明书（需联系客服获取完整版）
实验步骤
标准曲线制备（以10^2~10^7拷贝/μL为例）
标记离心管：编号7至2，分别加入45 μL模板稀释液。
梯度稀释：
7号管加入5 μL阳性对照（1×10^8拷贝/μL），震荡混匀，得到10^7拷贝/μL标准品。
依次转移5 μL至下一管，连续稀释至10^2拷贝/μL（每步更换枪头）。
保存标准品：稀释后立即置于冰上备用。
PCR反应体系
每20 μL反应体系包含：
10 μL预混液
2 μL引物探针混合液
2 μL模板DNA
6 μL无核酸酶水
扩增程序
预变性：95℃ 5分钟
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集荧光信号）
注意事项
分区操作：标准品稀释与样品处理需在独立区域进行，避免交叉污染。
质量控制：每批实验需包含阴性对照（监测污染）和阳性对照（验证灵敏度）。
数据解读：定量结果需通过标准曲线计算，Ct值＞35视为阴性。
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