预期用途
本试剂盒基于SYBR Green I 荧光染料法，用于定性或定量检测大鼠样本（血液、组织、细胞培养物）中的大鼠白血病病毒（RLV）RNA。适用于：
实验大鼠RLV感染的早期诊断与监测
大鼠生物制品（如血清、细胞系）的RLV污染筛查
抗病毒药物或疫苗研究中的病毒载量评估
产品名称 | 大鼠白血病病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Rat Leukemia Virus Dye-based qRT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3704 |
检测原理
RNA提取：从样本中纯化总RNA。
逆转录 (RT)：以RNA为模板，利用逆转录酶合成cDNA。
荧光定量PCR (qPCR)：
使用特异性引物扩增RLV目标基因（如pol、gag 或 env 基因保守区）。
SYBR Green I染料嵌入双链DNA产物中，释放荧光信号。
实时监测荧光强度，通过扩增曲线（Ct值）判定病毒RNA含量。
试剂盒组成
| 组分名称 | 体积/数量 | 保存条件 |
| 2× SYBR Green qPCR Master Mix | 1 mL / 瓶 | -20℃ |
| RT Enzyme Mix | 50 μL / 管 | -20℃ |
| RNase-Free Water | 1 mL / 瓶 | 室温 |
| RLV特异性引物混合液 (Primer Mix) | 100 μL / 管 | -20℃ |
| 阳性对照 (RLV RNA) | 50 μL / 管 | -80℃ |
| 阴性对照 (无核酸水) | 1 mL / 瓶 | 室温 |
实验需自备材料
RNA提取试剂盒（如TRIzol®）
实时荧光定量PCR仪
无RNase的PCR管、吸头、离心管
离心机、涡旋混合器
冰盒、移液器
操作流程
1. 样本RNA提取
按RNA提取试剂盒说明书操作，用80 μL无RNase水溶解RNA沉淀。
测定RNA浓度（OD260/280 ≈ 1.8~2.0），置于冰上备用。
2. 逆转录反应 (RT)
| 组分 | 体积 |
| 总RNA | ≤ 500 ng |
| 引物混合液 (Primer Mix) | 2 μL |
| RT Enzyme Mix | 1 μL |
| RNase-Free Water | 补至10 μL |
程序：37℃ 15 min → 85℃ 5 sec → 4℃保存。
3. 荧光定量PCR (qPCR)
| 组分 | 体积 |
| 2× SYBR Green Master Mix | 10 μL |
| cDNA产物 | 2 μL |
| RNase-Free Water | 7 μL |
| 总体积 | 20 μL |
扩增程序（以Bio-Rad CFX为例）：
95℃ 3 min (预变性)
循环40次：
95℃ 10 sec
60℃ 30 sec （荧光采集）
熔解曲线：65℃ → 95℃，每0.5℃采集荧光
结果判读
有效性判定：
阴性对照：无扩增曲线（Ct值=Undet）
阳性对照：Ct值 ≤ 35，且熔解曲线为单峰
样本判定：
阳性：Ct值 ≤ 38，熔解曲线峰与阳性对照一致
阴性：Ct值=Undet 或 Ct值>38
可疑：熔解曲线异常 → 建议重复检测
注意事项
严格分区操作：RNA提取、RT反应、qPCR反应需在不同超净台/房间进行，避免污染。
试剂保存：Master Mix、引物避光保存，反复冻融≤3次。
模板质量：降解RNA可导致假阴性；建议同时扩增大鼠内参基因（如β-actin）验证RNA完整性。
熔解曲线分析：是区分特异性产物与非特异性扩增的关键步骤。
性能参数
灵敏度：可检测≥10 copies/μL的病毒RNA
特异性：不与大鼠其他常见病毒（如RPV、H-1）交叉反应
重复性：批内/批间Ct值变异系数（CV）< 2%
公司正在出售的产品
山羊CYTB基因检测试剂盒(荧光PCR法) | 人细胞色素C氧化酶ELISA试剂盒 |
捻转毛细线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人玻连蛋白/体外粘连蛋白(VN/CD51+CD61)ELISA检测试剂盒 |
平尾毛细线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)检测试剂盒elisa |
毛细线虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人软骨糖蛋白39(HCgp-39)试剂盒elisa |
鸭肝炎病毒3型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 人不透光相关蛋白(OPAs)检测试剂盒elisa |
鸭肝炎病毒2型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 小鼠β连环蛋白/联蛋白(β-Cat)ELISA试剂盒 |
鸭肝炎病毒1型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 小鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)elisa试剂盒 |
鸭肝炎病毒通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 小鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)elisa试剂盒 |
牛肠道病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 人T细胞活化连接蛋白(LAT)试剂盒elisa |
真鲷虹彩病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人降解加速因子(DAF)elisa试剂盒 |
鲤疱疹病毒3型探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人S100B蛋白(S-100B)ELISA检测试剂盒 |
大鼠白血病病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒鲤疱疹病毒2型探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人锚蛋白B(Ank-B)elisa试剂盒 |
鲤疱疹病毒通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA试剂盒 |
肺炎克雷伯菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人抗巨细胞病毒抗体IgM(anti-CMVIgM)试剂盒elisa |
产酸克雷伯菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人抗弓形体IgM抗体(anti-toxIgM)检测试剂盒elisa |
关键字： 大鼠白血病病毒;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
派瑞曼pyram?是上海博湖生物科技有限公司（Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.，China）的产品品牌。
派瑞曼pyram?是一家化学、生化和材料科学等领域的科研用研发产品的制造商和供应商,我们的产品在相当宽的基础科学领域得到广泛的应用。 客户包括学术界、工业界和政府的研究和开发实验室以及制药、生物技术、化工/石化行业等具商业规模的企业。
派瑞曼pyram?除包括化学、分析化学、生命科学、材料科学和病理科学产品。质量是所有产品和服务最关键的组成部分,我们通过质量和实力赢得客户的信赖。产品的质量是企业的生命。
公司秉承"专注品质、诚信为本、服务至上、合作共赢"的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更专业的服务！