实验原理:
试剂盒采用双抗体夹心法。预先包被IL-5捕获抗体的微孔板依次加入标准品和待测样本,样本中的IL-5与固相抗体结合。随后加入生物素标记的检测抗体,形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素,催化底物TMB显色,颜色深浅与IL-5浓度正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样本中的IL-5浓度。
产品名称
小鼠白介素5(IL-5)ELISA试剂盒
英文名称
Mouse IL-5 ELISA Kit
规格
48T/96T
货号
A115424
试剂盒组成
预包被抗体的酶标板:用于固相抗体的固定。
标准品:已知浓度的IL-5溶液,用于绘制标准曲线。
生物素标记的检测抗体:与IL-5结合。
HRP标记的链霉亲和素:催化显色反应。
显色底物(TMB):在HRP作用下显色。
终止液:终止显色反应。
洗涤液:用于洗涤未结合的试剂。
样本稀释液:用于稀释待测样本。
检测范围与灵敏度
检测范围:通常为15.63-1000pg/mL。
灵敏度:最低检测浓度为15.6pg/mL。
操作步骤
准备试剂和样本:按说明书准备试剂,处理样本。
加样:将标准品和样本加入酶标板孔中。
温育:在指定温度下孵育,使抗体-抗原充分结合。
洗涤:洗去未结合的试剂,减少背景干扰。
加酶标抗体:加入生物素标记的检测抗体和HRP标记的链霉亲和素。
显色:加入TMB底物,避光孵育显色。
终止反应:加入终止液,终止显色。
读数:使用酶标仪在450nm波长下测定OD值。
计算:根据标准曲线计算样本中的IL-5浓度。
注意事项
样本处理:血清、血浆需离心处理,避免反复冻融。
试剂保存:试剂盒需按说明书保存,避免失效。
操作规范:使用一次性吸头,避免交叉污染;严格按步骤操作,确保结果准确性。
适用范围
本试剂盒适用于科研领域,用于检测小鼠血清、血浆、细胞培养上清液及相关生物液体中的IL-5浓度,不适用于临床诊断。
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ELISA试剂盒的主要优点缺点:
维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高,特异性强,结果准确 可能存在交叉反应,易受干扰物影响
操作体验 流程标准化,无需昂贵设备,适合高通量检测 步骤多且繁琐,耗时较长,对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测,长期看性价比尚可 单次试剂成本较高,且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量(如是否溶血)敏感
上海抚生实业有限公司
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