产品介绍:

大鼠白介素5(IL-5)ELISA试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清液及其他生物样本中IL-5的含量,广泛应用于免疫学、炎症、肿瘤、纤维化等科研领域。
产品名称 | 大鼠白介素5(IL-5)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Rat IL-5 ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A116504 |
检测原理
采用双抗体夹心法,预包被抗大鼠IL-5抗体,样本中的IL-5与抗体结合后,加入生物素化的抗IL-5抗体和HRP标记的亲和素,TMB显色,反应终止后在450nm波长测定吸光度,IL-5浓度与OD值呈正相关。

检测范围与灵敏度

检测范围通常为15.63-1000 pg/mL,灵敏度可达9.38 pg/mL(部分试剂盒最低检测限为1.0 pg/mL),具体参数因品牌不同略有差异
灵敏度高,可满足大多数科研样本检测需求
样本类型
血清、血浆(EDTA、肝素或柠檬酸盐抗凝)、组织匀浆、细胞上清液、尿液、胸腹水、脑脊液等
产品特点

高特异性,与其它细胞因子无交叉反应
重复性好,批内、批间差小
操作简便,适合高通量筛选
仅用于科研,不用于临床诊断
操作流程简述

准备试剂与样本,标准品倍比稀释
加样(标准品与待测样本),37℃温育30-60分钟
洗涤,加入生物素抗体和酶标亲和素
再次温育、洗涤,加入显色液TMB
终止反应,酶标仪450nm读数
绘制标准曲线,计算样本IL-5浓度
保存条件
2-8℃保存,有效期6个月
试剂与样本准备阶段

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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ELISA试剂盒的主要优点
ELISA之所以被广泛应用,主要归功于以下几个核心优势:
灵敏度高(抓得准):
它利用酶的催化放大作用,能将微弱的信号放大,因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质(甚至达到皮克级 pg/mL)。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质,它也能“捕捉”到。
特异性强(瞄得准):
基于抗原-抗体的特异性结合原理,试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应,很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率,结果准确可靠。
操作简便且快速:
相比于一些复杂的仪器分析方法,ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件,按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。
高通量与适用性广:
它通常采用96孔板或48孔板,一次实验可以同时处理几十个样本,非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外,它不仅能测蛋白,还能测抗体、激素、药物残留甚至农药,应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。
安全稳定:
不像放射免疫法那样使用放射性同位素,ELISA使用的是酶标记,对人体和环境无辐射危害,且试剂保存时间较长。
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