登革病毒2型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 登革病毒2型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Dengue Virus Type 2 Dye-based qRT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3594 |
产品特点
即开即用：用户仅需提供病毒RNA模板，操作简便。
高特异性：基于登革病毒2型保守序列设计引物，与其他病毒无交叉反应。
高灵敏度：检测下限可达几百拷贝/反应。
一管式检测：减少开盖步骤，避免气溶胶污染。
配套完整：含阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）及专用稀释液，便于标准曲线建立。
试剂盒组分
| 成分 | 规格 | 包装标识 |
| 2×qPCR MagicMix | 500μL（棕色管） |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） |
| 登革病毒2型PCR引物混合物 | 100μL（白盖） |
| 登革病毒2型阳性对照 | 50μL（红盖） | 1×10⁸拷贝/μL |
| 使用手册 | 1份 | — |
操作流程
样本准备：提取待测样本RNA，建议使用无RNase环境操作。
标准曲线制备（可选）：
将阳性对照按10倍梯度稀释（10²~10⁷拷贝/μL），用于定量分析。
稀释需在独立区域进行，避免污染其他组分。
反应体系配制：
每20μL反应体系包含：10μL 2×qPCR MagicMix、1μL引物混合物、1μL模板RNA、8μL无核酸酶水。
PCR程序设置：
反转录：50℃ 15分钟（若含RT步骤）；
预变性：95℃ 3分钟；
扩增循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环，荧光采集）。
注意事项
实验分区：试剂配制、样本处理及扩增需在不同区域进行，防止交叉污染。
质量控制：每次实验需包含阴性对照（无模板对照）及阳性对照。
储存要求：组分-20℃保存，避免反复冻融；解冻后需充分混匀并短暂离心。
生物安全：阳性对照为非传染性DNA片段，但仍需按生物安全二级标准操作。
预期结果
阳性样本：扩增曲线呈S型，Ct值≤35；
阴性样本：无扩增曲线或Ct值＞38。
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