登革病毒通用染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 登革病毒通用染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Dengue Virus Universal Dye-based qRT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3596 |
预期用途
本试剂盒适用于临床或科研中疑似登革热患者样本（如血清、血浆）的登革病毒RNA定性检测，可辅助诊断登革病毒感染，覆盖所有四种血清型（DENV-1/2/3/4）。
检测原理
采用一步法实时荧光定量RT-PCR技术（染料法），针对登革病毒基因组保守区域（如3'非编码区）设计特异性引物，通过SYBR Green等荧光染料标记扩增产物，实时监测PCR过程中的荧光信号变化，实现对病毒RNA的定性检测。
试剂盒组成
RT-PCR反应缓冲液
登革病毒通用反应液（含引物、dNTPs等）
酶混合液（逆转录酶、热启动Taq DNA聚合酶）
阳性对照（灭活登革病毒RNA）
阴性对照（RNase Free H2O）
内参对照（可选，用于监测提取与扩增效率）
核心性能参数
检测限：≤100 copies/mL（灵敏度可达10²–10³ copies/mL）。
线性范围：2×10³–1×10⁸ copies/mL。
特异性：与其他黄病毒属病毒（如寨卡病毒、黄热病病毒）无交叉反应。
适用仪器：兼容ABI 7500、QuantStudio系列、伯乐CFX96、罗氏LightCycler等主流荧光PCR仪。
储存条件与有效期
储存：-20℃避光保存，避免反复冻融（运输需干冰或冰袋）。
有效期：12个月（生产日期见外包装）。
操作流程
样本处理：采集全血分离血清/血浆，推荐使用配套RNA提取试剂盒。
反应体系配制：按比例混合反应液、酶液、模板RNA及对照品（总体积20–50 μL）。
PCR程序设置：
逆转录（50℃, 15 min）→ 预变性（95℃, 2 min）→ 扩增（95℃ 10 s, 60℃ 30 s, 40循环）。
结果判读：
阳性：扩增曲线呈S型且Ct值≤35（阈值需根据仪器优化）。
阴性：无扩增曲线或Ct值>40（需排除抑制物干扰）。
注意事项
实验需在BSL-2实验室进行，避免气溶胶污染。
严格分区操作（试剂配制区、样本处理区、扩增区）。
失效试剂表现为阳性对照无信号或阴性对照出现扩增。
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