产品用途

本试剂盒基于SYBR Green I荧光染料法,用于绵羊粪便、肠道组织或环境样本中绵羊鞭虫(Trichuris ovis)特异性DNA片段的定性及相对定量检测,适用于:
绵羊鞭虫病的临床诊断
牧场寄生虫防控监测
治疗效果评估
流行病学调查
产品名称 | 绵羊鞭虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Trichuris ovis Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3486 |

检测原理

DNA提取: 样本中提取基因组DNA。
qPCR扩增: 使用绵羊鞭虫特异性引物对靶基因(如ITS-2或18S rRNA基因保守区)进行扩增。
荧光信号采集: SYBR Green I染料嵌入双链DNA,释放荧光信号,强度与产物量成正比。
结果分析: 通过Ct值(循环阈值)判定目标DNA是否存在,并依据标准曲线进行相对定量。
试剂盒组成

| 组分 | 48T用量 | 96T用量 | 储存条件 |
| 2× SYBR Green qPCR Master Mix | 1.25 mL × 1 | 2.5 mL × 1 | -20℃ |
| 绵羊鞭虫 qPCR 引物混合液(干粉/预混) | 50 μL × 1 | 100 μL × 1 | -20℃ |
| ddH₂O(无核酸酶) | 1 mL × 1 | 1 mL × 2 | 室温 |
| 阳性对照(Trichuris ovis DNA) | 50 μL × 1 | 50 μL × 1 | -20℃ |
| 阴性对照(无核酸水) | 1 mL × 1 | 1 mL × 1 | 室温 |
注: 需自备DNA提取试剂、qPCR仪及配套耗材。
样本要求
类型: 绵羊新鲜粪便(推荐)、肠道内容物、固定组织。
处理: 粪便样本需尽快提取DNA或保存于-80℃;组织样本需匀浆后提取。
DNA纯度: OD260/280 ≈ 1.8–2.0,浓度 ≥ 20 ng/μL。
操作步骤

1. DNA提取
使用商用粪便/组织DNA提取试剂盒(如QIAamp PowerFecal Kit)按说明书操作。
2. qPCR反应体系配制(20 μL/反应)
| 组分 | 体积 |
| 2× SYBR Green Mix | 10 μL |
| 引物混合液 | 2 μL |
| 模板DNA | 2 μL (≤100 ng) |
| ddH₂O(无核酸酶) | 补足至 20 μL |
3. qPCR程序设置(以ABI 7500为例)
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 | 信号采集 |
| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 | 否 |
| 变性 | 95℃ | 15 sec | 40 | 是 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 30 sec | | 是 |
| 熔解曲线 | 60℃→95℃ | 按仪器默认 | 1 | 是 |
结果判读
阳性: Ct ≤ 35.0,且熔解曲线出现单一特异峰(Tm ≈ 82±1℃)。
可疑: Ct 35.1–38.0,建议重复检测。
阴性: 无Ct值或Ct > 38.0。
质控要求:
阳性对照:Ct ≤ 30.0
阴性对照:无扩增曲线
熔解曲线:单峰且Tm值匹配
性能参数

灵敏度: 检出限 ≤ 10 拷贝/μL(质粒标准品)
特异性: 不与捻转胃虫(Haemonchus contortus)、肝片吸虫(Fasciola hepatica)等常见寄生虫交叉反应
重复性: CV < 5%(同批次)
注意事项

实验分区操作(试剂准备区、样本处理区、扩增区),避免污染。
熔解曲线分析是区分非特异产物的关键步骤。
若样本存在抑制物(如粪便色素),建议稀释模板后复测。
本产品仅限兽医诊断使用,不可用于人类临床。
公司正在出售的产品

非典型猪瘟病毒(APPV)检测试剂盒(荧光PCR法) | 人免疫球蛋白A1ELISA试剂盒 |
液化沙雷菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 免疫球蛋白A2检测试剂盒 IgA2 ELISA Kit |
粘质沙雷菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 母系蛋白4检测试剂盒 MATN4 ELISA Kit |
沙雷菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 免疫缺陷伴血小板减少综合征蛋白家族成员2检测试剂盒 WASF2 ELISA Kit |
羊关联恶性卡他热病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 免疫缺陷伴血小板减少综合征蛋白检测试剂盒 WASP ELISA Kit |
绵羊痘病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 磷酸甘油酸酯激酶1检测试剂盒 PGK1 ELISA Kit |
腐败希瓦菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 鳞状细胞癌抗原1检测试剂盒 SCCA1 ELISA Kit |
志贺氏菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 磷脂酰肌醇蛋白聚糖6检测试剂盒 GPC6 ELISA Kit |
白鲟虹彩病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 木糖基转移酶Ⅰ检测试剂盒 XYLT1 ELISA Kit |
猴病毒40探针法荧光定量PCR试剂盒 | 木糖基转移酶Ⅱ检测试剂盒 XYLT2 ELISA Kit |
新加坡石斑鱼虹彩病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 卵巢滤泡激素检测试剂盒 FLCN ELISA Kit |
绵羊鞭虫染料法荧光定量PCR试剂盒中华根瘤菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 膜突蛋白检测试剂盒 MSN ELISA Kit |
鹅螺旋体病探针法荧光定量PCR试剂盒 | 免疫球蛋白超家族成员16检测试剂盒 IGSF16 ELISA Kit |
申克孢子探针法荧光定量PCR试剂盒 | 亲环素D检测试剂盒 CYPD ELISA Kit |
斑石鲷虹彩病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 亲核素β检测试剂盒 KPNβ ELISA Kit |
关键字: 绵羊鞭虫;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
派瑞曼pyram?是上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China)的产品品牌。
派瑞曼pyram?是一家化学、生化和材料科学等领域的科研用研发产品的制造商和供应商,我们的产品在相当宽的基础科学领域得到广泛的应用。 客户包括学术界、工业界和政府的研究和开发实验室以及制药、生物技术、化工/石化行业等具商业规模的企业。
派瑞曼pyram?除包括化学、分析化学、生命科学、材料科学和病理科学产品。质量是所有产品和服务最关键的组成部分,我们通过质量和实力赢得客户的信赖。产品的质量是企业的生命。
公司秉承"专注品质、诚信为本、服务至上、合作共赢"的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更专业的服务!