产品特点
即开即用：用户仅需提供待测DNA模板，试剂盒包含预混优化的引物、染料及反应体系。
高灵敏度与特异性：引物针对绵羊夏伯特线虫高度保守序列设计，避免与其他生物DNA/RNA交叉反应。
双重检测功能：
定性检测：通过Ct值判定阳性（Ct≤35）或阴性（Ct≥40），临界值（35<Ct<40）需复测确认。
定量检测：线性范围达5个数量级，可通过标准曲线计算样品DNA浓度。
内置对照：含阳性对照，用于排除假阴性结果，确保实验可靠性。
产品名称 | 绵羊夏伯特线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Chabertia ovina Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3517 |
操作流程
DNA提取
使用兼容的核酸提取试剂盒制备样品DNA，建议在独立样本制备区操作以避免污染。
标准曲线制备（定量检测适用）
按说明书稀释阳性对照至6个梯度浓度，标记为7（最高）至2（最低）。
每个梯度重复3次检测，确保数据稳定性。
PCR反应设置
反应体系：20μL/反应，含DNA模板、预混PCR Master Mix及荧光染料。
荧光信号采集：
染料激发波长471 nm（游离状态）/500 nm（结合DNA），发射波长530 nm。
信号采集建议在复性或延伸阶段进行。
数据分析
定性：阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤30且呈典型扩增曲线。
定量：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴拟合方程，推算样品浓度。
注意事项
实验需穿戴防护装备（实验服、口罩、手套），避免试剂接触皮肤或黏膜。
分区操作（样本制备区、扩增区），防止气溶胶污染。
试剂解冻后需充分混匀，短暂离心后使用。
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